實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔熱休克蛋白70elisa試劑盒   兔熱休克蛋白70試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔熱休克蛋白70試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白70試劑盒、兔熱休克蛋白70elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  5-Azacytidine  中文名：5-氮胞苷  分子式：C8H12N4O5  度：98.0%

兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Aminosalicylic acid  89-57-6  中文名：5-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔熱休克蛋白40elisa試劑盒   兔熱休克蛋白40試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔熱休克蛋白40試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白40試劑盒、兔熱休克蛋白40 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     5-Azacytidine  中文名：5-氮胞苷  分子式：C8H12N4O5 

兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5-Aminoindole  5192-03-0  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2  度：98.0%   

兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Aminosalicylic acid  89-57-6  中文名：5-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3
HNE2-LMP1/2細(xì)胞，細(xì)胞系 小鼠細(xì)胞,H22細(xì)胞 CM-H071腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL4-硝基兒茶酚4-NITROCATECHOL質(zhì)量規(guī)格：>98.0% ，進(jìn)口分裝

OS-RC-2(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2曲格列酮Troglitazone(CS-045)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Promocell C-27101 Chondrocyte Growth Medium, 軟骨細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml2-氨基-4'-氟二苯甲酮2-Amino-4'-fluorobenzophenone 質(zhì)量規(guī)格：>98%

骨骼肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2-氨基-4'-氯二苯甲酮2-amino-4'-chlorobenzophenone 質(zhì)量規(guī)格：大于98%，化學(xué)

WIF1 Others Mouse 小鼠 WIF1 / WIF-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 原百部堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Protostemonine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
CFSC-2G細(xì)胞，大鼠肝星形細(xì)胞 7721(7721細(xì)胞) tTA基因修飾的小鼠*癌細(xì)胞(B類(lèi));Pan02-CAG-tTA-3E6前列地爾，素E1Alprostadil,PGE1,質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,USP30

EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 標(biāo)簽)四1雌酮,1丙孕素Altrenogest質(zhì)量規(guī)格：> 99%

Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠細(xì)胞;L1210四1雌酮,1丙孕素(標(biāo)準(zhǔn)品)Altrenogest質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1鹽酸金剛烷胺Amantadine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞(HBdSF)(5×105)鹽酸金剛烷胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Amantadine HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Riligustilide  中文名：  分子式：C24H28O4  度：98.0%  兔子端粒酶elisa試劑盒   兔子端粒酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子端粒酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子端粒酶試劑盒、兔子端粒酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Tokinolide B  中文名：  分子式：C24H28O4  度：96.0%  兔子催乳素elisa試劑盒   兔子催乳素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子催乳素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子催乳素試劑盒、兔子催乳素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

嗜麥芽窄食單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）Methyl 4-O-feruloylquinate  中文名：  分子式：C18H22O9  度：95.0%  兔子可溶性?xún)?nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   兔子可溶性?xún)?nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子可溶性?xún)?nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性?xún)?nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒、兔子可溶性?xún)?nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Trehalose  中文名：海藻糖  分子式：C12H22O11  度：98.0%  兔子睪elisa試劑盒   兔子睪試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子睪試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子睪試劑盒、兔子睪elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Chlorogenic acid  中文名：綠原酸  分子式：C16H18O9  度：98.0%  兔子端粒酶elisa試劑盒   兔子端粒酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子端粒酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子端粒酶試劑盒、兔子端粒酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。