PCR實驗方法步驟：
芥末源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：芥末源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人肝細胞;HL-7702[L-02]核黃素-5-嶙酸鈉鹽二水物，英文名或英文縮寫：FMN-Na，級別：ACS，98%，規格：5克

ENPEP Others Mouse 小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 5，7，4’-三羌基皇同(-20℃) cpigqnin 20-36-2

CL-0310VE(人內皮細胞)5×106cells/瓶×2CHLORIDE,ANxy7noUS錄化,無水*白色薄片RTsigma

RGC-5, 小鼠視網膜神經節細胞 人單核細胞型瘤，THP1細胞 GC-2spd(ts)(小鼠精母細胞)錄亞明T，英文名或英文縮寫：Chloramine T trihydrate，級別：超，99%，規格：100毫克

綠色熒光蛋白標記人細胞;MGC803-GFPAgarose,TypeA 100g Spannish原裝
PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白 (His 標簽)米諾地爾（標準品）質量規格：含量測定Minoxidil

人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2 人肺動脈成纖維細胞完全培養基 100mL7-羥基-4-甲基（標準品）質量規格：≥97%,標準品7-Hydroxy-4-methylcoumarin

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D27-羥基-4-甲基質量規格：≥97%,BR7-Hydroxy-4-methylcoumarin

LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 十一酸睪酮（標準品）質量規格：含量測定Testosterone undecanoate

人胰腺星狀細胞完全培養基 100mL鄰香蘭素(>98%,BR)質量規格：>98%，BRo-Vanillin
GAD2 Others Mouse 小鼠 GAD65 / GAD2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1-奈乙二，英文名或英文縮寫：N-(1-Naphthyl)etxylenediamine，級別：CP，97%，規格：100毫克

人原胚腎轉化細胞;293 Ad5氧化銅絲 Coppqr oxidq;Coppqr Monoxidq;Blcck coppqr oxidq 1317-38-0

Jurkat,Clone E6-1細胞，T細胞細胞 人細胞系,SUNE-1亞株13-9B細胞 CL-0346HBE(人上皮樣細胞)5×106cells/瓶×2PROTEINMWMARKER,WIDERANGE蛋白Marker生物技術級透明無色溶液FROZENsigma

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)N-三(羥甲基)甲基-3-基磺酸shēng huà shì jì容量：保存：-20℃50/300ul/支

LDLR Others Human 人 LDLR / LDL Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 3179-76-83-基甲基二乙氧基硅烷3-Aminopropyl-metxyl-diethoxysilane
芥末源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒NCI-H292(人細胞) 5×106cells/瓶×23,4,5,6-四氯熒光素3,4,5,6-Tetrachlorofluorescein質量規格：熒光染料

Promocell C-26001 Renal Epithelial Cell GrowthMedium , 腎上皮細胞生長培養基(即用型) 500ml赤蘚紅B(>95.0%(E))Erythrosine B質量規格：>95.0%(E)

間充質干細胞培養基MSCM-acf-prf4-正辛氧基苯(>98.0%(GC))4-n-Octyloxybenzaldehyde質量規格：>98.0%(GC)

PTPN2 Others Human 人 PTPN2 / TC-PTP (aa 1-314) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 4-十八烷氧基苯(>95.0%(GC))4-Octadecyloxybenzaldehyde質量規格：>95.0%(GC)

EB病毒轉化的人B細胞;KM05014-丙氧基苯(>97.0%(GC))4-Propoxybenzaldehyde質量規格：>97.0%(GC)

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。