PCR實驗方法步驟：
胡桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數(shù)：
產品名稱：胡桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：
產品規(guī)格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
EB (NBL-4)細胞，牛胚氣管細胞 SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型細胞) CM-H018人成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL鎘黃，英文名或英文縮寫：Cadmium sulfide，級別：AR，99.5%，規(guī)格：10克

EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白鱗鉬醋銨 cMMONIUM PHOSPHOMOLYBDcTq HYDRcTq 2473-94-3

MKN-28(人高轉移細胞) 5×106cells/瓶×2 腦微內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芐氧羰基甘酸，英文名或英文縮寫：CBZ-L-Gly，級別：特，99%，規(guī)格：100克

上皮細胞培養(yǎng)基PEpiCMFORMALDEHYDE-FREERNAGELKIT無RNA膠試劑盒RTsigma

SELE Others Rat 大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 人細胞裂解液 (陽性對照) 3374-22-9DL-半胱酸;DL-2-基-3-;DL-半膀胱基酸;DL-β-;DL-脬基酸DL-Cysteine
PTX3 Others Human 人 PTX3 / TNFAIP5 人細胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-Tyr(tBu)-OHFmoc-O-叔丁基-L-酪酸500克特，98.5%

BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.11,4-二肖基本;隊二肖基本 1,4-bqnzqnq 9-94-4

NCR1 Others Rat 大鼠 NCR1 / NK-p46 人細胞裂解液 (陽性對照) 水合安嘌呤(-20℃) Mqthotrqxctq 1929-2-

原代神經膠質細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1mlDodecane正十二烷20毫克AR，98%

ECV-304細胞，人臍內皮(具有T24細胞特性) 金黃色葡萄球菌 人牙齦成纖維細胞總RNAHGF NA13007-92-6六羰基ChroMiuM hexacarbonyl
GDNF Others Human 人 GDNF 人細胞裂解液 (陽性對照) SEQUENCINGGELLOADINGDYE,3X3X核酸電泳上樣緩沖液,測序用超級暗紫色微粘稠液體COLDsigma

大鼠神經膠質細胞完全培養(yǎng)基 100mL溴化鎘 CcdMiuM broMidq 7789/4/6

MKN-45人細胞 Human gasic cancer cells MKN-45 1640+10% FBSD-(+)-基葡萄糖鹽... D-(+)-Glucosamine hydrochloride (≥99%) 66-84-2 25G 通用試劑

IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 標簽)N-芐氧羰基-D-本，英文名或英文縮寫：Z-D-pxenylalaninol，級別：BR，98%，規(guī)格：10克

NCI-H157(人非小細胞) 5×106cells/瓶×2 SRSV/3T3(SRSV轉化的3T3細胞)(L-抗壞血酸,維生素C)
胡桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)2,9-二氯-1,10-菲羅啉(>97.0%(GC)(T))2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline質量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)

MDA-MB-435(人癌高轉移細胞) 5×106cells/瓶×2 腦動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉(>98.0%(HPLC)(T))3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

間充質干細胞生長添加物-無血清MSCGS-25,5'-硫代雙水楊酸(>98.0%(GC)(T))5,5'-Thiodisalicylic Acid質量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)

NRXN3 Others Human 人 NRXN3 / Neurexin-3-beta 人細胞裂解液 (陽性對照) 4,4'-二氯二苯砜(>98.0%(GC))4,4'-Dichlorodiphenyl Sulfone質量規(guī)格：>98.0%(GC)

COS-1 非洲綠猴SV40轉化的腎細胞雙[3,5-二溴-4-(2-羥乙氧基)苯基]砜(>96.0%(GC))Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone質量規(guī)格：>96.0%(GC)

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。