操作流程：
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：牦牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
牦牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-酰-L-谷酰，英文名或英文縮寫：Alu-Gln，級別：BR，99%，規(guī)格：5克

長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184三溴新務(wù)醇 3-Bromo-2,2-bis(bromomqthyl)propcnol 2012/9/2

BHK細(xì)胞，幼倉鼠腎細(xì)胞 人細(xì)胞,CFPAC-1細(xì)胞 CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLGLYCEROLGELLOADINGDYE,5X5X核酸電泳上樣緩沖液,30%甘油超級暗紫色微粘稠液體COLDsigma

大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J5′-CTP，3Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸三鈉鹽500UBR，95%

RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 109-43-3癸二酸二丁酯Dibutyl Sebacate (AS)
PECAM1 Others Mouse 小鼠 PECAM1 / CD31 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蘆薈大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Aloeemodin

微內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHCMEC cDNA細(xì)胞色素C(馬源)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR，來源馬心Cytochrome C

SLPI Others Human 人 SLPI 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 細(xì)胞色素C(牛源)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR，來源牛心Cytochrome C

大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6細(xì)胞色素C(豬源)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR，來源豬心Cytochrome C

95-D細(xì)胞，高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 人細(xì)胞,M2e細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK盧立康唑質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRLuliconazole
HCCC-9810細(xì)胞，人膽管細(xì)胞型細(xì)胞 小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性,NFS-60細(xì)胞 水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)GENE-PAGEPLUS5%,WITHTTEBUFFER 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE生物技術(shù)級COLDsigma

MDBK(牛腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2黃蓍樹膠粉 Gum tragacanth powder 9000-65-1 100G 通用試劑

Promocell C-22170 Myocyte GrowthMedium KIT, 心肌細(xì)胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml單唾液神經(jīng)節(jié)苷酯(-20℃) GcNGLIOSIDq GM1, cMMONIUM ScLT, BOVINq 37728-47-7

kasumi-1, 人細(xì)胞株Atr莠去津5克超，100mM

ART4 Others Mouse 小鼠 Art4 / CD297 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 32449-92-6D-葡糖醛酸內(nèi)酯D-Glucurone
牦牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒家豬皮膚細(xì)胞;SSC-S14-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(含氮量：23.50-24.30 %)4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione質(zhì)量規(guī)格：含氮量：23.50-24.30 %

IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))N-tert-Butyl-α-phenylnitrone質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

HT-29 人細(xì)胞4-羥基氨苯蝶啶4-Hydroxy Triamterene質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

U-118 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-118 MG of brain asocytic blastoma DMEM培養(yǎng)基+10%FBS4-羥基氨苯蝶啶硫酸鈉鹽4-Hydroxy Triamterene Sulfate,  Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

VEGFA Protein Rat 重組大鼠 VEGF164 / VEGFA 蛋白2,4-二氨基-6-苯基-7-蝶啶2,4-Diamino-6-phenyl-7-pteridinol質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。