產品參數：
產品僅供科研使用產品名稱：動物源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
動物源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
VSIG8 Others Human 人 VSIG8 人細胞裂解液 (陽性對照) 人參皂甙Rb3，英文名或英文縮寫：Ginsenoside Rb3，級別：BR，規格：25克

人胚肺二倍體細胞;HEL-26-溴-1-己1 6-Bromo-1-hqxqnq 692-47-8

大鼠細胞;IR983F 腺癌細胞，Caco-2細胞 WEHI 164細胞，鼠纖維細胞系乙二茶堿，英文名或英文縮寫：Aminophylline hydrate，級別：AR，規格：25克

GBC-SD, 人細胞 Human氫氧化shēng huà shì jì容量：25克

CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細胞裂解液 (陽性對照) (2-羥基磺酸))
rCF, 大鼠成纖維細胞 A4細胞 HL-7702(肝細胞)醋酸舍莫瑞林 Sermorelin Acetate質量規格：≥98.0%

人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]磺胺嘧啶銀Silver Sulfadiazine質量規格：>98%,USP31,BR

EPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺嘧啶銀(標準品)Silver Sulfadiazine質量規格：>98%,標準品

人結細胞;T84辛伐他汀 Simvastatin質量規格：>99%,BR,細胞培養級

CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細胞裂解液 (陽性對照) 辛伐他汀,辛伐他丁（標準品）Simvastatin質量規格：HPLC>98%,標準品
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Egypt/ 3300-NAMRU3/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) Gold(III)chloride三錄化金1克特，97%

人胚;HFL1言醋布比卡應 Bupivcccinq xy7nochloridq 73360-24-0

狗腎細胞;Super Tube 胚胎成纖維細胞，3T6-Swiss albino細胞 Hed68細胞，果子貍腎上皮細胞橄欖油 Olive oil (highly refined, low acidity) 8001-25-0 100ML 通用試劑

人胚;WI-38 [WI38]EriochromeblueblackR依來藍R500克100s/盒

HA Others H4N6 甲型 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) L-Histidine 5g/10g Sigma分裝
動物源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒Caki-1, 人腎透明細胞癌細胞 Human(-)-Blebbistatin(-)-Blebbistatin質量規格：>98%

CEACAM1 Others Mouse 小鼠 CEACAM1 / CD66a 人細胞裂解液 (陽性對照) 奈達鉑;順糖氨鉑Nedaplatin質量規格：>98%,BR

角質細胞培養基KM5-甲基-1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T))5-Methyl-1,10-phenanthroline Hydrate 質量規格：>98.0%(T)

FAM20B Others Human 人 FAM20B / Gxk1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,10-鄰二氮雜菲-5,6-二酮(>98.0%(HPLC)(T))1,10-Phenanthroline-5,6-dione質量規格：>98.0%(HPLC)(T)

人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKINTPP(=四苯基卟啉)TPP (=Tetraphenylporphyrin) 質量規格：銅用超高靈敏分光光度試劑