產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：性大腸埃希氏菌五重探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
性大腸埃希氏菌五重探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;MuM-2B血清兔抗BSA10克RT

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 酰輔酶A 內(nèi)鹽 ≥93% (HPLC) (-20℃) ccqtyl coqnzymq c wo7ium sclt 1009-73-

MDA-MB-436 人腺癌細(xì)胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-50 Fine 9048-71-9 100G 分離試劑

NCI-H358人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSwo7iumGluconate葡萄糖酸鈉*白色至微黃色精細(xì)結(jié)晶RTsigma

KITLG Protein Human 重組人 SCF / C-kit ligand 蛋白 (aa 1-189, His 標(biāo)簽)(甘油)
RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人單核細(xì)胞)梓醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Catalpol

CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)5×106cells/瓶×2紫草素,左旋紫草素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Shikonin

RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 紫草酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Lithospermic acid

人內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HLECL紫丁香酚苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Syringin

A2780/Taxol細(xì)胞，人紫杉醇耐藥株 鼠腹水單核細(xì)胞瘤,J774A.1細(xì)胞 組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml竹節(jié)參皂苷IVa（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供含量測(cè)定用chikusetsu saponin Iva
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞錄化亞銻，英文名或英文縮寫：Antimony(III)chloride，級(jí)別：CP，規(guī)格：10克

ENPP2 Others Human 人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氧化鎢銨 Ammonium metatungstate hydrate,≥99.0% 174501-64-5 25G 通用試劑

大鼠嗅鞘細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1醋 ≥99%(2-8℃) LIGNOCqRIC cCID 227-29-2

DH82狗腎惡性癥細(xì)胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS曙紅Y(水溶)shēng huà shì jì容量：100克

IFNA5 Protein Human 重組人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)9025-35-8α-半乳糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.22
性大腸埃希氏菌五重探針法熒光定量PCR試劑盒P3X63Ag8.653細(xì)胞，細(xì)胞 耐長春新堿細(xì)胞系,HCT-8/VCR細(xì)胞 CM-H028人內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-Boc-N-去甲伊馬替尼N-Boc-N-Desmethyl Imatinib質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK伊立替康標(biāo)記物d10Irinotecan Labeled d10質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 6-O-甲基-d3-鳥嘌呤6-O-Methyl-d3-guanine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

口腔角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OKMN7-(2-氨基甲酰-2-羥乙基)鳥嘌呤N7-(2-Carbamoyl-2-hydroxyethyl)guanine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-氨基-6,8-二羥基嘌呤鹽酸鹽2-Amino-6,8-dihydroxypurine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口