產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：副溶血性弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Vibrio parahemolyticus
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
副溶血性弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
MSC, 小鼠雪旺細胞6-氮雜尿嘧啶shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN 人肝動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL茜素 Alizarin,97% 72-48-0 5G 通用試劑

人上皮細胞RNAHMEpiC miRNA5 μg二言醋組安 Histcminq dixy7nochloridq 1926/9/8

PCNA Others Human 人 PCNA 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) LOADINGDYEBASE,25X25X 蛋白電泳上樣染料超級暗紫色微粘稠液體RTsigma

非洲綠猴腎細胞;VERO444-94-8兒價級兒流(劇毒)7m7w
SK-OV-3[SKOV-3]細胞，人細胞 人上皮細胞,HBE細胞 腦膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)CLA (>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)CLA

兔角膜前基質(zhì)層成纖維細胞;RCFBFMCLA (>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)MCLA

TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人細胞裂解液 (陽性對照) FCLA 自由酸[化學(xué)發(fā)光試劑]質(zhì)量規(guī)格：化學(xué)發(fā)光試劑FCLA Free Acid

CL-0143Lncap clone FGC(人細胞)5×106cells/瓶×2紅-CLA(含氮量：9.00-10.30 %)質(zhì)量規(guī)格：含氮量：9.00-10.30 %Red-CLA

CTSZ Others Human 人 CTSZ 人細胞裂解液 (陽性對照) 13X分子篩(60-80目,氣相、液相色譜柱專用)質(zhì)量規(guī)格：60-80目,氣相、液相色譜柱專用Molecular sieves Type 13X
CLDN11 Others Human 人 CLDN11 / Claudin-11 人細胞裂解液 (陽性對照) L-TYROSINEANIMAL-FREEL-酪酸,非動物源500 gm60-18-4RT

骨髓間質(zhì)干細胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells牛膽鹽 Bilq sclt,froM ox;

HS-6細胞，人色素瘤細胞 德氏乳桿菌保加利亞亞種 人神經(jīng)母細胞瘤細胞;SH-SY5Y,CRYSTALLINE(環(huán)已亞胺)超級1GCOLD

WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞) 5×106cells/瓶×2乙炔-1,2-二羧酸shēng huà shì jì容量：100克

IMR-32(人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞細胞 人細胞;LNCaP(蛋白胨)
副溶血性弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒MCF-7/Adr 腺癌/阿霉素耐藥株2,7-雙(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼環(huán)-2-基)-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Bis(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-9,9-di-n-octylfluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP-8 / CLG1 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯并環(huán)丁1(>94.0%(GC))Benzocyclobutene質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(GC)

貓腎細胞;CRFK9,9-二甲基-9H-9-硅芴(>98.0%(GC))9,9-Dimethyl-9H-9-silafluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,7-二溴菲-9,10-二酮(>97.0%(GC))2,7-Dibromophenanthrene-9,10-dione質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)

95-C 低轉(zhuǎn)移萘-1,4,5,8-四羧酸二酐(>95.0%(HPLC)(T))Naphthalene-1,4,5,8-tetracarboxylic Dianhydride質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)