操作流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：霍亂弧菌1型探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Vibrio choleraeO1
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
霍亂弧菌1型探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
CM-R064大鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL2,2'-二氨基-4,4'-雙噻唑(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)2,2'-Diamino-4,4'-bithiazole

小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH3 小鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1H-咪唑-4,5-二羧酸(>97.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)(T)1H-Imidazole-4,5-dicarboxylic Acid

MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 Mouse2,6-萘二羧酸(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)2,6-Naphthalenedicarboxylic Acid

KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,4-萘二羧酸(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)1,4-Naphthalenedicarboxylic Acid

人細(xì)胞;MGC-8031,4-雙(*基硅基)-1,3-丁二炔(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)1,4-Bis(trimethylsilyl)-1,3-butadiyne
SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-鳥氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRD-Ornithine monohydrochloride

人間充質(zhì)干細(xì)胞(肝臟)cDNAHMSC-hp cDNAD-苯丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.98H-D-Phe-OtBu.HCI

U937細(xì)胞，組織細(xì)胞瘤 人肺巨細(xì)胞癌(PG)的低轉(zhuǎn)移亞系,PG-LH7細(xì)胞 腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-脯氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRD-Proline

犬源細(xì)胞D-苯丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRD-Phenylalanine

VCAM1 Others Human 人 CD106 / VCAM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRD-Alanine
T-102B胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)10mL正十九烷，英文名或英文縮寫：Nonadecane，級別：AR，98%，規(guī)格：1克

CD83 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD83 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 流化鋇 BcriuM sulfidq;Sulfurctqd bcrytc

少突膠質(zhì)前體細(xì)胞生長添加物OPCGS二氧嶙基鉬酸水合物，英文名或英文縮寫：Ammonium phosphomolybdate hydrate，級別：AR，99%，規(guī)格：25克

KLE細(xì)胞，人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 大鼠細(xì)胞,CRL-1548細(xì)胞 原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml氧化鎵shēng huà shì jì容量：RT10克

HA(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(Horseradish)辣根過氧化物酶
霍亂弧菌1型探針法熒光定量PCR試劑盒人胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901] 大鼠腦動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL羥基利托那韋Hydroxy Ritonavir質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

MLTC-1 小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞去噻唑基甲氧基碳酰 利托那韋Desthiazolylmethyloxycarbonyl Ritonavir質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

IL5RA Others Human 人 IL5Ra / CD125 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 9'-去甲格拉司瓊（格拉司瓊雜質(zhì)C）9'-Desmethyl Granisetron (Granisetron Impurity C)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

酶活性分析試劑盒CAT7-磺酰胺基-N-羥甲基氫氯噻嗪7-Sulfonamido-N-hydroxymethyl Hydrochlorothiazide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-氯氫氯噻嗪5-Chloro Hydrochlorothiazide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。