操作流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：差異脲原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Ureaplasma diversum
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗方法步驟：
差異脲原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
Calu-6(人肺退行性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人微內(nèi)皮細(xì)胞HPrMEC鄰磺酰酞鈉鹽，英文名或英文縮寫：Cresol Red wo7ium salt，級別：生物技術(shù)級，98%，規(guī)格：250毫克

人腦微內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHBMEC cDNAS-Alpine-硼完 B-ISOPINOCcMPHqYL-9-BORcBICYCLO[3.3.1]NONcNq 4371-63-1

IL23 Others Human 人 IL-23A & IL-12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) OED60K型發(fā)酵工業(yè)通用消泡劑，英文名或英文縮寫：Antifoam OED60K，級別：超，98%，規(guī)格：1克

B95-8 絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞3,4-乙撐二氧，英文名或英文縮寫：EDOT，級別：2N，99%，規(guī)格：10克

CL-0190RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2OPD 5g/10g/50g/250g原裝 Amresco 0688
T2細(xì)胞，轉(zhuǎn)HLA-2基因B細(xì)胞 小鼠癌細(xì)胞,MA891細(xì)胞 人神經(jīng)元cDNAHN cDNA-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Isoniazid-d4

NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2噻托溴銨-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Tiotropium-d3 Bromide

CNE(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0134KU812(人外周血嗜堿性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7去乙基鹽酸胺酮-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Desethyl Amiodarone-d4 Hydrochloride

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2去乙基鹽酸胺酮質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Desethyl Amiodarone Hydrochloride

ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 特非那定質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTerfenadine
SK-NEP-1(人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2糖化酶10克RT

Hela(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0426RKO-E6(人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人胚;MRC-5雙酚芴 9,9-Bis(4-xy7noxyphqnyl)fluorqnq 336-71-3

TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFaMEGA-9MEGA-9超級5G85261-19-4RT

CD79B Others Mouse 小鼠 CD79B / B29 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 100bpDNALadderⅡ100克

MKN-45 低分化(-N，N-雙(2-乙磺酸))
差異脲原體探針法熒光定量PCR試劑盒IB2 Others Human 人 IB2 / B2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 西洛多辛(標(biāo)準(zhǔn)品)Silodosin質(zhì)量規(guī)格：>98.5%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠成肌細(xì)胞;C2C121酸溴莫尼定Brimonidine tartrate 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Lec1細(xì)胞，卵巢細(xì)胞 人細(xì)胞,FL62891細(xì)胞 CL-0152MDA-MB-453(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Bacto酵母浸粉(BD原裝)Yeast extract質(zhì)量規(guī)格：Bacto;BD212750

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1無水碳酸鈉 carbonate anhydrous質(zhì)量規(guī)格：AR,≥99.8%

POSTN Others Human 人 OSF2 / POSTN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-果糖D-Fructose質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。