產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：克氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Trypanosoma cruzi
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
克氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y1,4-二羥基醌shēng huà shì jì容量：RT25克

21. 臍帶細(xì)胞系統(tǒng)四正丁基化銨 Tetrabutylammonium chloride.≥97.0 1112-67-0 5G 通用試劑

CM-H104真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLα-異十三烷基-ω-羌基-聚(氧-1,2-亞基) GqNcPOL(R) X-080 9043-30-2

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317 小鼠小腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-Hexadecane正十六烷*無色液體RTsigma

RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Rattus67-43-6二異胺DiisopropylaMine;N-(1-metxyletxyl)-2-propanaMine; DIPA;
TIMP2 Others Human 人 TIMP2 / TIMP-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2‘-脫氧胞苷質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR2'-Deoxycytidine;2'-dC

CL-0167NCI-H292(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×22‘-脫氧胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品2'-Deoxycytidine;2'-dC

CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2’-脫氧腺苷質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR2'-Deoxyadenosine monohydrate

小鼠腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL魚精DNA質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分，Sigma74782,蛋白小于1%DNA, Fishsperm

marc-145猴胚胎腎上皮細(xì)胞 Marc-145 monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10% FBS2,5-二苯基惡唑(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCPPO
人平滑肌細(xì)胞(HPSMC)(5×105) 細(xì)胞名稱 種屬乙醇脫氫酶100克

tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3E58-羌基虧哪啶 8-xy7noxyinonecldinq 86-81-3

人神經(jīng)細(xì)胞(HN) (10×106 )RNAMARKER-16S,23SRNA Marker2.5MGFrozen

膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)四本硼鈉shēng huà shì jì容量：25克

人上皮細(xì)胞;Ca Ski 大鼠腸巨噬細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(對硝本基-α-D-
克氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒小鼠細(xì)胞;L1210Nα-BOC-D-精氨酸鹽酸鹽一水合物Nalpha-BOC-D-Arginine hydrochloride hydrate質(zhì)量規(guī)格：BR

HELF細(xì)胞，人胚 鼠胚成骨細(xì)胞,3T3-E1細(xì)胞 CL-0146LTEP-a-2(人)5×106cells/瓶×2Boc-Arg(Mts)-OH·CHABoc-Arg(Mts)-OH·CHA質(zhì)量規(guī)格：BR

TM3(小鼠間質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2BOC-L-纈氨酸Boc-Val-OH質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

HPF-c 人類(HPF) 500,000cells 腮腺細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)BOC-L-天冬酰胺Boc-Asn-OH質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%,BR

腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Boc-L-谷氨酰胺Boc-Gln-OH質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR