產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：透明毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Trichostrongylus vitrinus
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
透明毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1N,N-二去甲基鹽酸曲美布汀-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N,N-Didesmethyl Trimebutine-d5 Hydrochloride

CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N,N-二去甲基鹽酸曲美布汀質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N,N-Didesmethyl Trimebutine Hydrochloride

腮腺細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)N-去甲基鹽酸曲美布汀質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N-Demethyl Trimebutine Hydrochloride

高背鯽魚尾鰭細(xì)胞;GBJd 人正常皮膚細(xì)胞，TE 353.Sk細(xì)胞 HO-8910(細(xì)胞)柚皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Naringenin-4'-O-beta-D-Glucuronide

人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251N-甲酰伐倫克林質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N-Formyl Varenicline
TNFRSF21 Others Mouse 小鼠 DR6 / TNFRSF21 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 毒死蜱(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Chlorpyrifos

CM-H093人顱蓋造骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2%Cyromazin solution

LILRB1 Others Human 人 LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 多菌靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Carbendazim

人直腸平滑肌細(xì)胞HRSMC(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%Carbaryl

Ca Ski細(xì)胞，人小腸頸部表皮樣癌細(xì)胞 人癌細(xì)胞,ZR75-1細(xì)胞 狗間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪DMSC-ad鹽酸水蘇堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Stachydrine hydrochloride
CSF3 Others Human 人 G-CSF / GCSF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二乙基乙酰與米酸酯，英文名或英文縮寫：Dietxyl acetamidomalonate，級別：BR，99%，規(guī)格：5毫克

tTA基因修飾的小鼠細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C52，2-二羌基二流代-6，6-聯(lián) 6-xy7noXY-2-NcPHTHYL DISULFIDq 6088-21-3

CCL20 Others Mouse 小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 聚醇縮，英文名或英文縮寫：PVF，級別：AR，99%，規(guī)格：5克

CM-M096小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL噻本隆shēng huà shì jì容量：25克

A-375 [A375], 人惡性素瘤細(xì)胞株 瘤細(xì)胞,U-937細(xì)胞 NCI-N87(人細(xì)胞)Polypeptone 500g原裝 Japan
透明毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2萊苞迪甙C（標(biāo)準(zhǔn)品）Rebaudioside C質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠細(xì)胞;IR983F 腺癌細(xì)胞，Caco-2細(xì)胞 WEHI 164細(xì)胞，鼠纖維細(xì)胞系D-(-)-扁桃酸;R-扁桃酸(R)-(?)-Mandelic acid質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

GBC-SD, 人細(xì)胞 Human1-氨基海因鹽酸鹽;AHD，1-氨基乙內(nèi)酰脲鹽酸鹽1-Aminohydantoin Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-氨基海因鹽酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）1-Aminohydantoin Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

尿道上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)人促腎上腺皮質(zhì)激素(1-24),替可克肽ACTH (1-24), human質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR