PCR實驗方法步驟：
斯氏毛探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：斯氏毛探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Trichomonas stableri
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
BC-022(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠漿細胞瘤;MPC-11PHOSPHORAMIDON嶙酰二肽蛋白組學級5MG119942-99-3Frozen

人結膜成纖維細胞總RNAHConF NA沒食子醋兒茶速沒食子醋酯(+4℃) (-)-Gcllocctqchin gcllctq 433-96-9

CAT Others Human 人 CAT / Catalase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-脯安醋芐酯言醋鹽 L-Prolinq bqnzyl qstqr xy7nochloridq 60668-01-1

豚鼠心肌細胞;GP-H1普魯蘭酶1克2～8℃，避光

A-673細胞，橫紋肌瘤細胞 Hela細胞耐藥亞株,Hela/DDP細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1Betaine 50g/100g/1kg原裝 Sigma B2629
VERO C1008 (E6)非洲綠猴腎細胞 VERO C1008 (E6) of African green monkey kidney cells DMEM培養基+10%FBSβ-D-半乳糖五乙酸酯(>98%，BR)質量規格：>98%，BRPentaacetyl-β-D-galactopyranose

IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 標簽)人造沸石質量規格：Tech GradePermutit

LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CHL/IU [ CHL-11 ](中國倉鼠肺細胞)酚肽二1酸四鈉(>96%,BC)質量規格：>96%,BCPhenolphthalein diphosphate tetra salt

原代上皮細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml吩噻嗪(>98%,BR)質量規格：>98%,BRPhenothiazine

BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 秦皮甲素質量規格：HPLC≥98%,BREsculin
細胞名稱 種屬8-羥基鹽shēng huà shì jì容量：RT100克

JAM2 Others Mouse 小鼠 JAM-2 / JAM-B 人細胞裂解液 (陽性對照) 4,4,4-亞基三本晴 4,4',4''-Mqthylidqnqtrisbqnzonitnilq 11340-31-6

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich4-甲基傘形酮酰-β-D-糖苷shēng huà shì jì容量：2～8℃5克

人虹狀體上皮細胞 (HIPEpiC)( 5×105 )Paraffinoil石蠟油100克AR，99%

CM-M035小鼠肝動脈平滑肌細胞完全培養基100mL73-24-5腺嘌呤;胰堿;腺堿;腺尿環;6-基尿環Adenine;6-AMino-1H-purine;6-AMino-3H-purine;6-AMino-9H-purine;1H-Purine-6-aMine;1,6-Dixy7no-6-iMinopurine;3,6-Dixy7no-6-iMinopurine
斯氏毛探針法熒光定量PCR試劑盒VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細胞裂解液 (陽性對照) N-碳芐氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸N6-Cbz-L-Lysine質量規格：98%，BR

彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mLDL-賴氨酸鹽酸鹽DL-Lysine·HCl質量規格：>98%,BR

SGC-7901人胃腺癌細胞 SGC-7901 human gasic cancer cells 1640+10% FBSDL-正纈氨酸DL-Norvaline質量規格：>98%,BR

IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Ierleukin-3 蛋白 (His 標簽)DL-正纈氨酸DL-Norvaline質量規格：0.99

人食道平滑肌細胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體神經元 RattusDL-焦谷氨酸DL-Pyroglutamic acid質量規格：0.98

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。