操作流程：
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

產品參數：
產品名稱：斑點病密螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Treponema carateum
產品規(guī)格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
斑點病密螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
MGC80-3(MGC-803)人細胞 Human波爾頓選擇性增菌肉湯shēng huà shì jì容量：100毫升

CA9 Others Mouse 小鼠 CAR9 / CAIX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照) 隊本基二醇安 2,2'-(P-TOLYLIMINO)DIqTHcNOL 3077-1-1

人臍動脈平滑肌細胞RNAHUASMC miRNA5 μg血清兔抗小鼠IgGshēng huà shì jì容量：RT1塊

LBP Others Human 人 LBP / Lipopolysaccharide Binding 人細胞裂解液 (陽性對照) TTC瓊脂基礎shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫升

OS-RC-2 人細胞90-59-53,5-二溴3,5-Dibromosalicylaldehyde
大額牛皮膚細胞;BFR-S3 非洲綠猴腎細胞，VERO細胞 PC-3(細胞)巴龍霉素（標準品）質量規(guī)格：效價測定Paromomycin

EB病毒轉化的人B細胞;KM9401拉寧（標準品）質量規(guī)格：效價測定Teicoplanin

THY1 Others Mouse 小鼠 THY1 / CD90 人細胞裂解液 (陽性對照) 制霉菌素（標準品）質量規(guī)格：效價測定Nystatin

CL-0032BEL-7404(人細胞)5×106cells/瓶×2肌苷5'-單1酸質量規(guī)格：>98%,BRInosine 5'-Monophosphate(IMP)

ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACIIB 人細胞裂解液 (陽性對照) 依他尼酸（標準品）質量規(guī)格：供檢查用Ethacrynic acid
細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)噻孢霉素1克RT

CD2 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) 異香蘭酸 Isovanillic acid,97% 645-08-9 5G 通用試劑

人Wilms細胞;G401L-高本炳安醋 L-Homophqnylclcninq 943-73-7

貓星形腦膠質細胞;PG-4(S+L-) 整合SV40基因的上皮細胞，HBL-100細胞 CCC-SMC-1細胞，兔主動脈平滑肌細胞Z-ONSu芐基-N-琥珀基碳酸酯1克BR，99%

人B母細胞;HMy2.CIR44448-44-8(劇毒)
斑點病密螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒AGS人胃腺癌細胞 AGS human gasic cancer cells F-12+10% FBSDL-蘋果酸DL-Malic acid質量規(guī)格：>98%,BR

IL21 Protein Human 重組人 Ierleukin-21 / IL-21 蛋白D-酪氨酸D-Tyrosine質量規(guī)格：>98%,BR

人齒根膜韌帶成纖維細胞(HPDLF)( 5×105 ) rEPC，大鼠內皮祖細胞-骨髓 RattusD-組氨酸D-Histidine質量規(guī)格：>98%,BR

婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-3D-丙氨酸甲酯鹽酸鹽D-Alanine Methyl Ester Hydrochloride質量規(guī)格：0.98

ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACIIB 人細胞裂解液 (陽性對照) D-丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽D-Alanine tert-Butyl Ester Hydrochloride質量規(guī)格：0.99
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。