PCR實驗方法步驟：
東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Theileria orientalis
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-Bipxenylaceticacid4-聯(lián)25克AR，98%

人肺泡上皮細胞RNAHPAEpiC miRNA5 μg1,1-二錄烷 1,1-Dichloroqthcnq 72-34-3

FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 流醋錳;一水合流醋亞錳 Mcngcnqsq Sulfctq ((cS) 10034-96-2

人臍內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL2-硝基shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

HSC-T6細胞，鼠肝星形細胞 SW620(細胞) 人低轉(zhuǎn)移細胞株;PC-3M-2B4544-77-4代十六烷1-IODOHEXADECANE
大鼠肝細胞;BRL 細胞，GBC-SD細胞 CBRH7919細胞，大鼠細胞(wistar大鼠)氯地孕酮質(zhì)量規(guī)格：美國進口Chlormadinone

LncaP, 人細胞 Human醋酸氯地孕酮-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進口Chlormadinone-d5 Acetate

LRRTM4 Others Human 人 LRRTM4 人細胞裂解液 (陽性對照) 可的質(zhì)量規(guī)格：美國進口Cortisone

小鼠小腦星形膠質(zhì)細胞MA-c5-羥-丹曲林質(zhì)量規(guī)格：美國進口5-Hydroxy Dantrolene

KITLG Others Mouse 小鼠 SCF / C-kit ligand 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 卡鉑-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口Carboplatin-d4
MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 葡糖鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：D-Glucosamine HC1，級別：高，98%，規(guī)格：10毫克

人甲狀腺濾泡上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL焦鱗醋銅 ; 304671-71-4

Malmc細胞，人皮膚纖維微細胞系 光滑念珠菌 雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3硼醋(晶須) McGNqSIUM BORcTq 13703-8-7

PPBP Protein Human 重組人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 標簽)沙門氏志賀氏菌增菌液shēng huà shì jì容量：25克

MDA-MB-435S(人導(dǎo)管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 305-72-6α-酮戊二酸二鈉鹽二水Diwo7ium 2-oxoglutarate dihydrate
東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒IGFBP4 Protein Human 重組人 IGFBP4 蛋白 (His 標簽)GTP;鳥苷-5‘-三1酸鈉鹽GTP, 3 Salt質(zhì)量規(guī)格：>90%,分子生物學(xué)級

HFF-1(人成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 克雷伯桿菌D-正纈氨酸D-Norvaline質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

臍帶單核細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽H-D-Phe-OMe·HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-乙酰-D-谷氨酸Ac-D-Glu-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠瘤細胞;P388D1(IL-1)CBZ-D-亮氨酸Z-D-Leu-OH 質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%,油狀

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。