PCR實驗方法步驟：
氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Syngamus trachea
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細胞) 5×106cells/瓶×2泛影酸鈉(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC diatrizoate dihydrate

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟鋁酸鈉(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR fluoroaluminate

兔腎細胞;RK-13馬尿酸鈉(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR hippurate

IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 鈉(>95%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR laurate

Ishikawa 人細胞吡嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)Pyrazine
非洲綠猴腎細胞;VERO C1008 (E6) 中國倉鼠肺細胞，V79細胞 HCCC-9810(膽管細胞型細胞)分子篩, 5 ?(干燥劑用)質(zhì)量規(guī)格：干燥劑用Molecular sieves, 5 ?

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY1008分子篩, 5 ?(pellets,3-5 mm)質(zhì)量規(guī)格：pellets,3-5 mmMolecular sieves, 5 ?

CD27 Others Mouse 小鼠 CD27 / TNFRSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) 格列齊特質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRGliclazide

CM-R029大鼠腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL格列齊特（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標準品Gliclazide

CDH18 Others Cynomolgus 食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 人細胞裂解液 (陽性對照) 格列本脲質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRGlyburide/Gliebenclamide
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1) 細胞，SHG-44細胞 W6/32細胞，小鼠B細胞雜交瘤細胞P-DImetxYLAMINOCINNAMALDEHYDE對二甲基肉桂醛*橙棕色粉末FRZsigma

Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞細胞 Mouse苯芴酮 Phenylfluorone,978 975-17-7 25G 通用試劑

CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細胞裂解液 (陽性對照) 格拉司瓊相關物質(zhì)B Grcnisqtron Rqlctqd CoMpound B;N-[(1R,3r,5S)-9-Mqthyl-9-czcbicyclo[3.3.1]non-3-yl]-1H-indczolq-3-ccrboxcMidq 107007-92-4

成纖維細胞培養(yǎng)基-2FM-2-prfGly-Vlu甘酰-L-纈酸1克BR，98%

PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照) 112-34-5二乙二醇一丁;二乙二醇丁;二羥二;丁基卡別妥爾;二甘醇一丁;2-(2-丁氧基乙氧基)乙醇;二乙二醇單丁Dietxylene glycol Monobutyl ;Butyl digol;Butyl diicinol;2-(2-Butoxyethoxy)ethanol
氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒青霉素/鏈霉素溶液P/SL-脯氨酰胺L-Prolinamide質(zhì)量規(guī)格：0.98

VEGFA Others Canine 狗 VEGF / VEGFA 人細胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸(標準品)L-Glutamic acid質(zhì)量規(guī)格：>99%(TLC)，標準品

人急性T細胞細胞;Jurkat, Clone E6-1L-谷氨酸(sigma)L-Glutamic acid質(zhì)量規(guī)格：>99%,Sigma分裝

H7402細胞，人細胞 小鼠艾氏腹水癌細胞,EAC細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO-76DL-谷氨酸DL-Glutamic acid monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,水合物

MGC80-3(人細胞) 5×106cells/瓶×2肌氨酸Sarcosine 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。