PCR實驗方法步驟：
氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Syngamus trachea
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
ARPE-19(人視網膜上皮細胞) 5×106cells/瓶×2泛影酸鈉(>98%,BC)質量規格：>98%,BC diatrizoate dihydrate

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟鋁酸鈉(>98%,BR)質量規格：>98%,BR fluoroaluminate

兔腎細胞;RK-13馬尿酸鈉(>98%,BR)質量規格：>98%,BR hippurate

IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 鈉(>95%,BR)質量規格：>95%,BR laurate

Ishikawa 人細胞吡嗪(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)Pyrazine
非洲綠猴腎細胞;VERO C1008 (E6) 中國倉鼠肺細胞，V79細胞 HCCC-9810(膽管細胞型細胞)分子篩, 5 ?(干燥劑用)質量規格：干燥劑用Molecular sieves, 5 ?

EB病毒轉化的人B細胞;KMY1008分子篩, 5 ?(pellets,3-5 mm)質量規格：pellets,3-5 mmMolecular sieves, 5 ?

CD27 Others Mouse 小鼠 CD27 / TNFRSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) 格列齊特質量規格：>95%,BRGliclazide

CM-R029大鼠腸平滑肌細胞完全培養基100mL格列齊特（標準品）質量規格：HPLC>95%,標準品Gliclazide

CDH18 Others Cynomolgus 食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 人細胞裂解液 (陽性對照) 格列本脲質量規格：>99%,BRGlyburide/Gliebenclamide
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1) 細胞，SHG-44細胞 W6/32細胞，小鼠B細胞雜交瘤細胞P-DImetxYLAMINOCINNAMALDEHYDE對二甲基肉桂醛*橙棕色粉末FRZsigma

Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞細胞 Mouse苯芴酮 Phenylfluorone,978 975-17-7 25G 通用試劑

CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細胞裂解液 (陽性對照) 格拉司瓊相關物質B Grcnisqtron Rqlctqd CoMpound B;N-[(1R,3r,5S)-9-Mqthyl-9-czcbicyclo[3.3.1]non-3-yl]-1H-indczolq-3-ccrboxcMidq 107007-92-4

成纖維細胞培養基-2FM-2-prfGly-Vlu甘酰-L-纈酸1克BR，98%

PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照) 112-34-5二乙二醇一丁;二乙二醇丁;二羥二;丁基卡別妥爾;二甘醇一丁;2-(2-丁氧基乙氧基)乙醇;二乙二醇單丁Dietxylene glycol Monobutyl ;Butyl digol;Butyl diicinol;2-(2-Butoxyethoxy)ethanol
氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒青霉素/鏈霉素溶液P/SL-脯氨酰胺L-Prolinamide質量規格：0.98

VEGFA Others Canine 狗 VEGF / VEGFA 人細胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸(標準品)L-Glutamic acid質量規格：>99%(TLC)，標準品

人急性T細胞細胞;Jurkat, Clone E6-1L-谷氨酸(sigma)L-Glutamic acid質量規格：>99%,Sigma分裝

H7402細胞，人細胞 小鼠艾氏腹水癌細胞,EAC細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO-76DL-谷氨酸DL-Glutamic acid monohydrate質量規格：>98%,水合物

MGC80-3(人細胞) 5×106cells/瓶×2肌氨酸Sarcosine 質量規格：>99%,BR

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。