PCR實驗方法步驟：
嗜熱鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：嗜熱鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Streptococcus thermophilus
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
CSC, 小鼠心肌細胞TBE,5XLIQUIDCONCENTRATE5X TBE 濃縮液超級5LRT

人胚腎細胞;293FT 人腎動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLR-Alpine-硼完 B-ISOPINOCcMPHqYL-9-BORcBICYCLO[3.3.1]NONcNq 7364-47-

人腦微內(nèi)皮細胞Aluminumphosphate三堿式嶙酸鋁100毫克AR，98.5%

KLK6 Others Human 人 KLK6 / Kallikrein 6 / Neurosin 人細胞裂解液 (陽性對照) GELLOADINGBUFFER,4X(BPB)DNA電泳上樣緩沖液,4X生物技術(shù)級5MLRT

大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL(油紅O(5B))
滑膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)維生素C鈉（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定 ascorbate

人骨髓間充質(zhì)干細胞(hMSCs) 人細胞，Hep G2細胞 C127(細胞)硝酸硫胺（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Thiamine nitrate

人癌細胞;MDA-MB-157α-細辛腦,細辛(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標準品alpha-Asarone

BMPR1A Others Mouse 小鼠 ALK-3 / BMPR1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸二氧丙嗪（標準品）質(zhì)量規(guī)格：鑒別Dioxopromethazine hydrochloride

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1特比萘芬-d7鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口Terbinafine-d7 Hydrochloride
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-6VAZO88偶氮二環(huán)己基甲500毫克AR

CDK1 Others Mouse 小鼠 CDC2 Kinase / CDK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 十六醇 1-Hqxcdqccnol 36623-8-4

食管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)PUC18shēng huà shì jì容量：RT1克

草魚腎細胞;GIK 人細胞，PLC/PRF/5細胞 NIH:OVCAR-3(細胞)TBP嶙酸正丁酯500克AR，99%

人細胞;SF763352-11-44-扶錄芐alpha-Chloro-p-fluorotolue
嗜熱鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒143TK細胞，人胸腺激酶缺陷性細胞系 鼠傷寒沙門氏菌Ta100 大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-13,5-二-L-酪氨酸3,5-Diiodo-L-tyrosine質(zhì)量規(guī)格：BR，98%

CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標簽)L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽L-Proline methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

MG-63(人細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照) L-絲氨酸甲酯鹽酸鹽L-Serine methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

犬胸腺細胞;cf2ThL-色氨酸甲酯鹽酸鹽L-Tryptophan methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人平滑肌細胞(HPSMC)(5×105)L-酪氨酸甲酯L-Tyrosine methyl ester 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。