操作流程：
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：豬痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Swine Poxvirus(SWPV)
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
豬痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
人細(xì)胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]膽甾醇乙酸脂，英文名或英文縮寫：Cholesteryl acetate，級(jí)別：高，98%，規(guī)格：200U

CD80 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD80 / B7-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 肖醋鈰 99% CqRIUM(III) nitncTq HqXcHYDRcTq 1094-41-4

CM-H106人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLAMMONIUMPHOSPHATE,MONOBASIC嶙酸二氫ACS級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma

MGC803-GFP細(xì)胞，綠色熒光蛋白標(biāo)記人細(xì)胞 人成細(xì)胞,Saos-2細(xì)胞 293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GPL-MINEL-甲(蛋酸)美國藥典級(jí)500G63-68-3COLD

Eca-109(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2a-Amylase 500g 國產(chǎn)
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO C1008 (E6)R-(-)-氯吡格雷硫酸氫鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口R-(-)-Clopidogrel Hydrogen Sulfate

HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 萘普酮-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Nabumetone-d3

敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1DL-4-羥基-2-酮戊二酸二鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口DL-4-Hydroxy-2-ketoglutarate di salt

OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 3(R,S)-羥基去氧孕1質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口3(R,S)-Hydroxy Desogestrel

卵巢微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)氯吡格雷硫酸氫鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Clopidogrel hydrogen sulfate
HBE, 正常人上皮細(xì)胞系2-()乙磺酸shēng huà shì jì容量：保存：-20℃200微升/支

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0903 新生兒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL酚AS-TR乙酸酯 Naphthol AS-TR acetate 35245-26-2 50MG 通用試劑

成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acfGN增菌培養(yǎng)基 Grcm Nqgctivq qnrichmqnt Mqdium

Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) TERRIFICBROTH,POWDER*肉湯, 粉末生物技術(shù)級(jí)粉末RT不sigma

雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7111-77-3二乙二醇單2-(2-metxoxyethoxy)ethanol
豬痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒FCGRT & B2M Others Human 人 FCGRT & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-精氨酸-α-酮戊二酸鹽（2:1）L-Arginine AKG 2:1質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EC-304? 人內(nèi)皮細(xì)胞L-谷氨酸-5-甲酯L-Glutamic acid 5-methyl ester質(zhì)量規(guī)格：0.98

CM-M054小鼠子宮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-乙酰-L-亮氨酸N-Acetyl-L-leucine質(zhì)量規(guī)格：>99%

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞N'-Cbz-L-鳥氨酸L-Orn(Z)-OH質(zhì)量規(guī)格：0.98

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0904 細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-乙酰-L-丙氨酸N-Acetyl-L-phenylalanine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。