PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
中間葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：中間葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Staphylococcus intermedius
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
D407細(xì)胞，人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 出芽短梗霉 人急性T細(xì)胞性細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572)(R)-N-去乙基奧昔布寧鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口(R)-N-Desethyl Oxybutynin Hydrochloride

ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)α-去環(huán)己基-α-苯基奧昔布寧質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口α-Descyclohexyl-α-phenyl Oxybutynin

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2 小鼠 AMICA1 / JAML 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (S)-N-去乙基鹽酸奧昔布寧質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口(S)-N-Desethyl Oxybutynin Hydrochloride

水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)(S)-鹽酸奧昔布寧質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口(S)-Oxybutynin hydrochloride

ERBB4 Others Rat 大鼠 HER4 / ErbB4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 奧司他韋酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Oseltamivir Acid
前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基PAM-prf10-羥基喜樹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,S構(gòu)型，標(biāo)準(zhǔn)品(s)-10-hydroxycamptothecin

Hela細(xì)胞，人Hela細(xì)胞耐藥亞株(Hela/DDP) 小鼠骨髓細(xì)胞,FDC-P1細(xì)胞 原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml甘草素（消旋）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Liquiritigenin

HB611(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鳥嘌呤硫酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98.0%，進(jìn)口原裝Guanine Sulfate

hMSC-UC Pellet 人類臍帶基質(zhì)中的間質(zhì)干細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人總RNAHPF NA腺嘌呤鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAdenine hydrochloride

CM-M097小鼠皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL肌苷；核苷質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRInosine
CDH1 Others Rat 大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲基纖維素10克

Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2,4-二錄錄芐 2,4-Dichlorobqnzyl chloridq 94-99-2

CCRF-CEM細(xì)胞，人急性細(xì)胞T細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,C3細(xì)胞 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHHSEC cDNA尼龍膜N+5克2～8℃

PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2菌種培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100毫升

CT26.WT(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0198RM-1(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10-錄本酚2-Chloropxenol
中間葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒mCF, 小鼠成纖維細(xì)胞 MouseN-芐氧羰基-L-蘇氨酸Z-Thr-OH質(zhì)量規(guī)格：0.98

FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-芐基甘氨酸鹽酸鹽N-Benzylglycine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人癌細(xì)胞;MDA-MB-453N-芐基甘氨酸乙酯N-Benzylglycine ethyl ester質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人內(nèi)皮細(xì)胞 (HLEC)( 5×105 )氨基扎那米韋Zanamivir Amine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CL-0431RT4(人膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2維達(dá)列汀羧酸代謝產(chǎn)物Vildagliptin Carboxylic Acid Metabolite質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。