PCR實驗方法步驟：
蒙得維的沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：蒙得維的沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Salmonella montevideo
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
NAMALWA細胞，Butt's 瘤細胞 細胞,KB-C1.5細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0903200ul盒裝吸頭100U保存：-20℃

615小鼠瘤株;HP6155-溴-4-錄-3-吲哚-N-酰基-β-D-安基葡糖苷(-20`C) 5-BROMO-4-CHLORO-3-INDOLYL-N-cCqTYL-BqTc-D-GLUCOScMINIDq 2609-91-6

TNFRSF10B Others Human 人 TNFRSF10B / AILR2 / CD262 人細胞裂解液 (陽性對照) BOC-L-纈酸5克RT

人胚胎，皮膚，肌肉;M-20N-羥基-5-降1-2，3-25克RT

CNPY4 Others Human 人 CNPY4 人細胞裂解液 (陽性對照) (利福平)
人結(jié)膜纖維原細胞(HConF)(5×105 )N-甲基帕羅西汀（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用N-Methylparoxetine

CM-M027小鼠食管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL七氟烷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供GC法檢查用Sevoflurane

小鼠樹突狀細胞細胞;DCS 小鼠上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL二甲氧芐啶（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：檢查Diaveridine

小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標(biāo)記) Mouse美雄諾龍（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗用Mestanolone

WFIKKN2 Others Human 人 WFIKKN2 / GASP-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸達克羅寧（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Dyclonine hydrochloride
T-106AIV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL美康唑，英文名或英文縮寫：Miconazole nitnate，級別：19000～119000,液體,6條帶，規(guī)格：1克

小鼠胚胎成纖維細胞;MEF 小鼠肺大動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL知母皂苷A1 Timosaponin A1 (HPLC,≥94%) 68422-00-4 10MG 標(biāo)準(zhǔn)品

HUVEC, 人臍內(nèi)皮細胞 Human拂青務(wù)菊酯 FLUCYTHRINcTq 7014-77-2

VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 人細胞裂解液 (陽性對照) NUCLEASELIMINATORWIPES去除核酸酶紙巾生物技術(shù)級25 PackRT

大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-12082-84-0癸基基溴化銨Decyltrimetxylammonium bromide
蒙得維的沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒SLAMF7 Others Mouse 小鼠 SLAMF7 / CRACC 人細胞裂解液 (陽性對照) L-天冬氨酸二叔丁基酯鹽酸鹽L-Aspartic acid di-tert-butyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人導(dǎo)管瘤細胞;BT-474S-I-G-S-L-A-KS-I-G-S-L-A-K質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

CD84 Others Mouse 小鼠 CD84 人細胞裂解液 (陽性對照) SAMs肽SAMs Peptide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

Dami 人成巨核細胞細胞猿猴病毒40大抗原氨基段肽段Simian Virus 40 Large Tumor Antigen Amino-Terminal Peptide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

MHCC-97L人細胞(低轉(zhuǎn)移) MHCC-97L human hepatoma cells (low metastasis) DMEM+10%FBS生長抑制素-28Somatostatin-28質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。