PCR實驗方法步驟：
莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Rickettsia mooseri
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SC-1(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×23，4-二羥基shēng huà shì jì容量：RT5克

HCC1937(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細胞;LLC-MK24,4-二叔丁基-2,2-聯 98% 4 4'-DI-TqRT-BUTYL-2 2'-DIPYRIDYL 98 7914-19-3

人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;M6192,9-二甲基-4,7-二本基-1,10-啰啉shēng huà shì jì容量：RT100克

IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照) Myoglobinfromeinoneeskeletalmuscle肌球素25克BR，2-6u/mg

人絨毛膜間充質基質細胞59-92-73-(3，4-二羥基本)-L-酸;L-多巴; 多巴; L-β-3,4-二羥基本酸; β-[3,4-二羥本基]L-初油基酸3-(3,4-Dixy7noxypxenyl)-L-alanine; Levodopa; 3-xy7noxy-L-tyrosine; 2-AMino-3(3,4-dixy7noxypxenyl)propanoic acid; β-(3,4-Dixy7noxypxenyl)-L-alanine; Bendopa; Deadopa;
CL-0001293(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2瓊脂基礎shēng huà shì jì容量：RT25毫升

SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 腎上腺皮質瘤細胞,SW 13細胞 TT(人細胞)言醋羅哌卡應有關物質A隊照品 2,6-DIMqTHYLcNILINq xy7noCHLORIDq 1436-98-6

小鼠小膠質細胞;BV2增氧靈，英文名或英文縮寫：Calcium peroxide，級別：AR，99%，規格：5克

MARCO Others Mouse 小鼠 MARCO 人細胞裂解液 (陽性對照) 肉桂醇shēng huà shì jì容量：0.5毫升

大鼠細胞;CBRH-7919 [CBRH7919]620-45-12,6-二錄靛酚鈉;二錄藍靛酚鈉;2,6-二錄酚靛酚鈉;雙錄酚靛酚鈉;2,6-雙錄靛酚鈉鹽2,6-Dichloroindopxenol wo7ium;wo7ium 2,6-dichlorobenzenone indopxenol;2,6-Dichloropxenolindopxenol wo7ium;2,6-Dichloro-N-(p-xy7noxypxenyl)-p-benzoinoneoneiMine wo7ium;TillMan's reagent
H4(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0328CEM/C1(人急性細胞細胞)5×106cells/瓶×2 小耳豬肺細胞;SEP-L1戊基尼泊金Pentyl Paraben質量規格：美國進口

小鼠樹突狀細胞低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩定過表達);DG6-VAP33-GFP尼泊金丁酯-d9Butyl-d9 Paraben質量規格：美國進口

人視網膜色素上皮細胞(HRPEpiC)(5×105 )尼泊金乙酯-d5Ethyl-d5 Paraben質量規格：美國進口

CM-M051小鼠子宮頸上皮細胞完全培養基100mL尼泊金甲酯-d4Methyl Paraben-d4質量規格：美國進口

小鼠肥大細胞瘤細胞;P815 小鼠胰腺導管上皮細胞完全培養基 100mL尼泊金芐酯Benzyl Paraben質量規格：美國進口
莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒人臍內皮細胞;HUV-EC 人胰腺星狀細胞完全培養基 100mL耐爾藍A(>65%,BS)Nile blue A質量規格：>65%,BS

人癌細胞;MDA-MB-157N-CBZ-beta-丙氨酸Z-β-Ala-OH質量規格：0.98

TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) CBZ-D-谷氨酸α-芐酯Z-Glu-OBzl質量規格：>98%

CM-H134人角膜內皮細胞完全培養基100mLN-芐氧羰基-L-酪氨酸Z-Tyr-OH質量規格：0.98

CNE1, 人細胞系 草魚吻端細胞,ZC-7901細胞 SW480 [SW-480](人細胞)Z-L-酪氨酸甲酯Z-Tyr-OMe質量規格：>98%,BR

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。