PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
鮭腎桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：鮭腎桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Renibacterium salmoninarum
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞偶氮脒類引發(fā)劑V65100毫克保存：-20℃

轉(zhuǎn)化細(xì)胞 人卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2,3-務(wù)二同 97% 2,3-Pqntcnqdionq 600-14-6

人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞RNAHCPF miRNA5 μg碳酸10克

KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 小鼠血清(無菌)100克RT

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)2-脫氧鳥苷-5-三1酸鈉鹽(+4℃)NA
細(xì)胞名稱 種屬二水合錄化鈣，英文名或英文縮寫：Calcium chloride dihydrate，級別：AR，99.5%，規(guī)格：250毫克

CD83 Others Human 人 CD83 / HB15 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 羧化輔酶 ≥97%(-20℃) Coccrboxylcsq 124-87-0

大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-EUREA,8MSOLUTION尿素蛋白組學(xué)級透明無色液體COLDsigma

人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HAEC)( 5×105 )2-乙基丁醇，英文名或英文縮寫：2-etxyl-1-butanol，級別：高，99%，規(guī)格：25克

CL-0019AAV-293(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Ammoniumsulfate 250g/500g/1kg/5kg Amresco 0191
PAH Others Human 人 PAH / PH (415 Asn/Asp) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十二烷基硫酸鋰Lithium Dodecyl Sulfate質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級

CM-R094大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL硫代甜菜堿 8Sulfobetaine 8質(zhì)量規(guī)格：>98%,sigma分裝

HEC-1A, 人細(xì)胞系 肝細(xì)胞,BRL細(xì)胞 TE 115.T(人軟組織細(xì)胞)硫代甜菜堿 10Sulfobetaine 10質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠細(xì)胞;L1210硫代甜菜堿 12Sulfobetaine 12,SDDAB質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 恩他卡朋;COMT抑制劑Entacapone質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
鮭腎桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鋅試劑Zincon質(zhì)量規(guī)格：螯合劑

F344大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cellsN-甲基-N-*硅基乙酰胺(>92.0%(GC))N-Methyl-N-TMS-acetamide質(zhì)量規(guī)格：>92.0%(GC)

U373細(xì)胞，人腦細(xì)胞系 福氏志賀氏菌(Shigella flexneri) 人無色素睫狀上皮細(xì)胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μgN-*基硅基咪唑(>98.0%(T))N-Trimethylsilylimidazole質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

SK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2N-*基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))N-Trimethylsilylacetamide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ211,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))1,1,3,3-Tetramethyldisilazane質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。