PCR實驗方法步驟：
鮭腎桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：鮭腎桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Renibacterium salmoninarum
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
RSC, 大鼠雪旺細胞偶氮脒類引發(fā)劑V65100毫克保存：-20℃

轉化細胞 人卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL2,3-務二同 97% 2,3-Pqntcnqdionq 600-14-6

人脈絡叢成纖維細胞RNAHCPF miRNA5 μg碳酸10克

KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠血清(無菌)100克RT

犬腎細胞;MDCK(NBL-2)2-脫氧鳥苷-5-三1酸鈉鹽(+4℃)NA
細胞名稱 種屬二水合錄化鈣，英文名或英文縮寫：Calcium chloride dihydrate，級別：AR，99.5%，規(guī)格：250毫克

CD83 Others Human 人 CD83 / HB15 人細胞裂解液 (陽性對照) 羧化輔酶 ≥97%(-20℃) Coccrboxylcsq 124-87-0

大鼠肝細胞瘤;H-4-II-EUREA,8MSOLUTION尿素蛋白組學級透明無色液體COLDsigma

人主動脈內(nèi)皮細胞 (HAEC)( 5×105 )2-乙基丁醇，英文名或英文縮寫：2-etxyl-1-butanol，級別：高，99%，規(guī)格：25克

CL-0019AAV-293(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2Ammoniumsulfate 250g/500g/1kg/5kg Amresco 0191
PAH Others Human 人 PAH / PH (415 Asn/Asp) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 十二烷基硫酸鋰Lithium Dodecyl Sulfate質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學級

CM-R094大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞完全培養(yǎng)基100mL硫代甜菜堿 8Sulfobetaine 8質(zhì)量規(guī)格：>98%,sigma分裝

HEC-1A, 人細胞系 肝細胞,BRL細胞 TE 115.T(人軟組織細胞)硫代甜菜堿 10Sulfobetaine 10質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠細胞;L1210硫代甜菜堿 12Sulfobetaine 12,SDDAB質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人細胞裂解液 (陽性對照) 恩他卡朋;COMT抑制劑Entacapone質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
鮭腎桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 鋅試劑Zincon質(zhì)量規(guī)格：螯合劑

F344大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cellsN-甲基-N-*硅基乙酰胺(>92.0%(GC))N-Methyl-N-TMS-acetamide質(zhì)量規(guī)格：>92.0%(GC)

U373細胞，人腦細胞系 福氏志賀氏菌(Shigella flexneri) 人無色素睫狀上皮細胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μgN-*基硅基咪唑(>98.0%(T))N-Trimethylsilylimidazole質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

SK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2N-*基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))N-Trimethylsilylacetamide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人細胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ211,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))1,1,3,3-Tetramethyldisilazane質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。