產品參數：
產品僅供科研使用產品名稱：蛙病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Ranavirus
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
蛙病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
L-6TG細胞，肌母細胞 人細胞,JCA-1細胞 人胚;MRC-5間硝基本胺100u

獼猴皮膚細胞;MMS4啊利新藍8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1

ECE2 Others Human 人 ECE-2 人細胞裂解液 (陽性對照) γ-環糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3

人腎上皮細胞總RNAHREpiC NA，英文名或英文縮寫：potewwium xy7noxide，級別：CP，98%，規格：100克

小鼠少突膠質前體細胞(MOPC)(5×105)N-AcetylneuneminicAcid 25mg/100mg原裝 INALCO1758-0100
大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3無水三錄化，英文名或英文縮寫：Chromium(III) chloride anxy7nous，級別：標準品，99%，規格：5克

LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細胞裂解液 (陽性對照) 三氧化二鈷 COBcLT(III) OXIDq BLcCK 1308-04-9

LA795瘤 肺腺癌IMIDAZOLE咪唑蛋白組學級白色至淺黃色固體RTsigma

SK-OV-3人細胞 Human ovarian cancer cell line SK-OV-3 McCoy'5A+10% FBS4,4′-亞甲基二安替比林，英文名或英文縮寫：DAM，級別：AR，99%，規格：500克

FLT3LG Protein Mouse 重組小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 標簽)Ampholine PH4-6/5-7/6-9/3-9.5 國產
LLC-MK2細胞，恒河猴腎細胞 人轉基因細胞,RKO-E6細胞 CM-H117人腦內皮細胞完全培養基100mL山梨酸鉀（標準品）Potassium Sorbate質量規格：含量測定

正常大鼠腎細胞;NRK甲磺酸倍他司汀（標準品）Betahistine mesylate質量規格：含量測定

IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細胞裂解液 (陽性對照) 葡醛內酯（標準品）Glucurolactone質量規格：檢查

小鼠小膠質細胞MM反鉑transplatin 質量規格：>95%

FAM19A2 Others Human 人 FAM19A2 人細胞裂解液 (陽性對照) 草酸（標準品）Oxalic acid質量規格：含量測定
蛙病毒探針法熒光定量PCR試劑盒SK-N-SH細胞，人神經上皮瘤細胞 環狀芽孢桿菌 人上皮細胞RNAHPEpiC miRNA5 μg氫氧化鈣(>95%,BR)Calcium hydroxide質量規格：>95%,BR

SF767(人細胞) 5×106cells/瓶×2N-甲酰伐倫克林N-Formyl Varenicline質量規格：美國進口

HCT-15(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BN-葡萄糖苷伐倫克林Varenicline N-Glucoside質量規格：美國進口

人細胞;CNE-2Z伐倫克林氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide質量規格：美國進口

AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細胞裂解液 (陽性對照) 去乙酰基長春瑞濱Deacetyl Vinorelbine質量規格：美國進口