產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：蛙病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Ranavirus
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
蛙病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
L-6TG細胞，肌母細胞 人細胞,JCA-1細胞 人胚;MRC-5間硝基本胺100u

獼猴皮膚細胞;MMS4啊利新藍8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1

ECE2 Others Human 人 ECE-2 人細胞裂解液 (陽性對照) γ-環(huán)糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3

人腎上皮細胞總RNAHREpiC NA，英文名或英文縮寫：potewwium xy7noxide，級別：CP，98%，規(guī)格：100克

小鼠少突膠質前體細胞(MOPC)(5×105)N-AcetylneuneminicAcid 25mg/100mg原裝 INALCO1758-0100
大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3無水三錄化，英文名或英文縮寫：Chromium(III) chloride anxy7nous，級別：標準品，99%，規(guī)格：5克

LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細胞裂解液 (陽性對照) 三氧化二鈷 COBcLT(III) OXIDq BLcCK 1308-04-9

LA795瘤 肺腺癌IMIDAZOLE咪唑蛋白組學級白色至淺黃色固體RTsigma

SK-OV-3人細胞 Human ovarian cancer cell line SK-OV-3 McCoy'5A+10% FBS4,4′-亞甲基二安替比林，英文名或英文縮寫：DAM，級別：AR，99%，規(guī)格：500克

FLT3LG Protein Mouse 重組小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 標簽)Ampholine PH4-6/5-7/6-9/3-9.5 國產(chǎn)
LLC-MK2細胞，恒河猴腎細胞 人轉基因細胞,RKO-E6細胞 CM-H117人腦內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL山梨酸鉀（標準品）Potassium Sorbate質量規(guī)格：含量測定

正常大鼠腎細胞;NRK甲磺酸倍他司汀（標準品）Betahistine mesylate質量規(guī)格：含量測定

IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細胞裂解液 (陽性對照) 葡醛內(nèi)酯（標準品）Glucurolactone質量規(guī)格：檢查

小鼠小膠質細胞MM反鉑transplatin 質量規(guī)格：>95%

FAM19A2 Others Human 人 FAM19A2 人細胞裂解液 (陽性對照) 草酸（標準品）Oxalic acid質量規(guī)格：含量測定
蛙病毒探針法熒光定量PCR試劑盒SK-N-SH細胞，人神經(jīng)上皮瘤細胞 環(huán)狀芽孢桿菌 人上皮細胞RNAHPEpiC miRNA5 μg氫氧化鈣(>95%,BR)Calcium hydroxide質量規(guī)格：>95%,BR

SF767(人細胞) 5×106cells/瓶×2N-甲酰伐倫克林N-Formyl Varenicline質量規(guī)格：美國進口

HCT-15(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BN-葡萄糖苷伐倫克林Varenicline N-Glucoside質量規(guī)格：美國進口

人細胞;CNE-2Z伐倫克林氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide質量規(guī)格：美國進口

AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細胞裂解液 (陽性對照) 去乙酰基長春瑞濱Deacetyl Vinorelbine質量規(guī)格：美國進口