PCR實驗方法步驟：
浣熊痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：浣熊痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Raccoonpox virus
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人真皮成纖維細胞-胎兒總RNAHDF-f NA絞股藍皂苷XLIX(標準品)質量規格：HPLC≥98%，標準品Gypenoside XLIX

KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人細胞裂解液 (陽性對照) YM-201636質量規格：>98%,PIKfyve抑制劑YM201636

人真皮微內皮細胞完全培養基 100mL金石蠶苷（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Poliumoside

VERO E6細胞，猴腎細胞系 Lec1(卵巢細胞) 小鼠結締組織L細胞株929克隆;L-929 [L929]金絲桃苷(標準品)質量規格：HPLC≥98%，標準品Hyperoside

EFNA5 Protein Canine 重組狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)6-甲氧基-2-萘乙酮（標準品）質量規格：TLC法檢查2-Acetyl-6-methoxynaphthalene
CNDP1 Others Human 人 CNDP1 人細胞裂解液 (陽性對照) CarboxypeptidaseB精蛋白酶100克BR，99%

大鼠骨骼肌成肌細胞;L6二十二烷酸 Behenic acid,99% 112-85-6 1G 通用試劑

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 蘇木色精;蘇 HqMctoxylin;(Z)-11-HDOL;xy7noxybrcsilin;Ncturcl blcck-1;C.I.75290 217-8-

T-111A木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mLN-Acetyl-L-Glutamine茶酸100微克BR，98%

HB細胞，人細胞 人臍內皮細胞,HUVEC(原代)細胞 大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-11707-03-5二本基1酸Dipxenylphosphinic acid
HEH 人胚胎組織來源細胞群勃龍醋酸酯 Revalor-H Trenbolone acetate質量規格：>98%,BR,可用于細胞培養

CM-R083大鼠滑膜細胞完全培養基100mL水飛薊賓(標準品)Silibinin質量規格：HPLC>97%，標準品

NCI-N87 [N87]人細胞水飛薊賓Silibinin質量規格：>97%,BR

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0928 人前脂肪細胞完全培養基 100mL依澤替米貝;依折麥布Ezetimibe質量規格：>99%

小鼠星形膠質細胞MA依澤替米貝;依折麥布(標準品)Ezetimibe質量規格：HPLC>99%,標準品
浣熊痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒L W-3A 小鼠皮下結締組織細胞羥基波生坦Hydroxy Bosentan質量規格：美國進口

CM-H067人腎系膜細胞完全培養基100mLN-去甲基克拉霉素N-Desmethyl Clarithromycin質量規格：美國進口

B16-F10, 小鼠色素瘤高轉移細胞阿糖胞苷 5‘-單1酸鹽Cytarabine 5'-Monophosphate質量規格：美國進口

人卵巢;PA-1 人視網膜muller細胞完全培養基 100mL達卡巴嗪-d6Dacarbazine-d6質量規格：美國進口

人表皮色素細胞-淺色素cDNAHEM-l cDNA達沙替尼β-D-葡萄糖苷Dasatinib β-D-Glucuronide質量規格：美國進口

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。