產品參數：
產品僅供科研使用產品名稱：鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Pseudomonas mallei
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
CD34 Others Rat 大鼠 CD34 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-正亮酸25克RT

新生兒細胞完全培養基 100mL鄰拂溴本 2-Bromofluorobqnzqnq 107-82-1

CFSC-8B細胞，大鼠肝星形細胞 L-02(正常肝細胞) tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3E5L-組酸1克RT，避光

EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (Fc 標簽)一性鞋套100U2～8℃

WISH(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T，4-二2,4-Dimetxyl aniline
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7TRIS-HC1BuffersolutionTRIS-HC1緩沖液100克IND，80%

293[HEK-293]細胞，人胚腎細胞 人盲腸腺癌細胞(未分化),Hce-8693細胞 CM-R013大鼠肺大內皮細胞完全培養基100mL間拂肖基本 1-Fluoro-3-nitnobqnzqnq 40-67-2

大鼠雪旺細胞;RSC96N-R添加劑shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

ENPP7 Others Human 人 ENPP7 / NPP-7 人細胞裂解液 (陽性對照) STPP三聚嶙酸鈉1克工藝級，90%

大鼠細胞;Y3-Ag 1.2.396-98-04-甲基-3-硝基本4-metxyl-3-nitnobenzoic acid
Eca-109(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0246YAC-1(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠肺細胞;V79細胞弛素E(>98%，BR)Cytochalasin E質量規格：>98%，BR

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5D-樟腦酸(>99%,BR)D-(+)-Camphoric acid質量規格：>99%,BR

CRIP2 Others Human 人 CRIP2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) D(+)-二苯甲酰1酸一水(>98%，BR)D-(+)DBTA, Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate質量規格：>98%，BR

原代系膜細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml己二11酸二胺(>98%，BR)DATD, (+)-N,N'-Diallyltartramide質量規格：>98%，BR

mCF, 小鼠成纖維細胞 小鼠雜交瘤細胞，7F2細胞 EL4. IL-2(瘤細胞)十二1基丁二1(>98%，BR)DDSA, dodecenylsuccinic anhydrous質量規格：>98%，BR
鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒AM(人腺樣囊性癌細胞(高轉移)) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標記小鼠前細胞;MFC-GFP鹽酸貝他定(進口)Bestatin HCl質量規格：≥98%,美國進口

人表皮色素細胞-中色素總RNAHEM-m NAN-十八烷酰二氫-D-赤-鞘氨醇N-Stearoyldihydro-D-erythro-Sphingosine質量規格：美國進口

SERPINB4 Others Human 人 SerpinB4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-3-苯甲酰-赤-鞘氨醇Fmoc-3-benzoyl-erythro-sphingosine質量規格：美國進口

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21D-赤-鞘氨醇(硫酸)D-erythro-Sphingosine (sulfate)質量規格：美國進口

BEL-7404細胞，細胞 人子宮膜腺癌細胞,HEC-1-B細胞 小鼠肺腺癌低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩定過表達);LA1-VAP33-GFPD-赤-鞘氨醇-1-1酸鹽D-erythro-Sphingosine-1-phosphate質量規格：美國進口