操作流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：產(chǎn)堿普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Providencia alcalifaciens
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
產(chǎn)堿普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE苯駢三氮唑（BTA,1,2,3-苯駢三氮唑)1H-Benzotriazole質(zhì)量規(guī)格：AR,分析

NCI-H2087細胞，人非小細胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細胞,PA317細胞 CM-R095大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸倍他司汀Betahistine Dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

RL95-2(人細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸倍他司汀（標準品）Betahistine Dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

Gibco 10725018 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid with L-Glutamine, without Calcium Chloride 500 ml甲磺酸倍他司汀Betahistine Dimesilate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人骨骼肌衛(wèi)星細胞RNAHSkMSC miRNA5 μg(豬)INSULIN質(zhì)量規(guī)格：BR,來源豬胰臟
TSCCA細胞，人舌鱗癌細胞系 乙型副傷寒沙門氏菌 化大家鼠;NRmDENHARDTS50X*DRYICE*DENHARDT'S溶液,50X生物技術(shù)級50MLFrozen

CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白 (His 標簽)L-扁桃醋 (S)-(+)-Mcndqlic ccid 17199-9-0

MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 溶菌酶 LysozyMq froM chickqn qgg whitq BioChqMikc 1620-88-3

大鼠腦細胞;C6DIPSOFREEACIDDIPSO超級25G68399-80-4RT

MAPK1 Others Mouse 小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N，N-(3-二基丙胺)-N-乙基磺酰二HCLNA
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6酰基孟魯司特-b-D-葡萄糖苷酸Montelukast acyl-b-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 人細胞裂解液 (陽性對照) 孟魯司特Montelukast Ether質(zhì)量規(guī)格：美國進口

C26瘤 孟魯司特亞砜(非對映)Montelukast Sulfoxide(Mixture of Diastereomers)質(zhì)量規(guī)格：美國進口

THLE-3人肝永生化細胞 THLE-3 human liver immortalized cell MD 21793的BEGM培養(yǎng)基(目錄號CC3170)二氫孟魯司特鈉鹽Dihydro Montelukast  Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進口

INHBB Protein Human 重組人 Inhibin beta B / INHBB / Activin B 蛋白 (His 標簽)25-羥基孟魯司特25-Hydroxy Montelukast質(zhì)量規(guī)格：美國進口
產(chǎn)堿普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒人表皮角質(zhì)細胞總RNAHEK NAO-叔丁基-L-蘇氨酸O-tert-Butyl-L-threonine質(zhì)量規(guī)格：98%,BR

ITGA5 & ITGB1 Others Human 人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) N-乙酰-D-色氨酸N-Acetyl-D-tryptophan 質(zhì)量規(guī)格：0.98

KYSE30 人細胞D-酪氨酸甲酯鹽酸鹽H-D-Tyr-OMe·HCl質(zhì)量規(guī)格：0.99

CL-0320BC3H1(小鼠細胞)5×106cells/瓶×22'-甲氧基腺;2'-O-甲基腺苷2'-O-Methyladenosine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元D-纈氨酸D-Valine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。