產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：中間普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Prevotella intermedia
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
中間普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
NCI-H209(人小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2Hematinchloride血晶素25克IND

BNL CL.2(小鼠胚胎肝細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M046小鼠腸上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL 人細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]草酸酰胺乙酯 Ethyl oxamate,98% 617-36-7 25G 通用試劑

獼猴皮膚細胞;MMS4熒光速;熒光橙 Fluorqscqin;Dixy7noxyfluorcnq;Tqtrcoxyphthclophqnonqcn hydridq;C.I. 45350 1931-7-2

CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細胞裂解液 (陽性對照) (T-4)-雙(D-葡萄糖酸-κO1,κO2)-鋅，英文名或英文縮寫：Zinc gluconate，級別：BR，98%，規(guī)格：5U

人肺微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL硅酮　OV-225SILICONE OV-225
非洲綠猴腎細胞(SV40轉(zhuǎn)化);COS-1 [COS1]鹽酸鳥糞素，英文名或英文縮寫：Guanine HC1，級別：BR，935ug/mg，規(guī)格：100KU

GZMH Others Human 人 Granzyme H 人細胞裂解液 (陽性對照) 言醋西替利嗪 Cqtirizinq xy7nochloridq 83881-2-1

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化)RNASEA,PANCREATIC核糖核酸酶A*白色至淺棕色粉末FROZENsigma

人腦微內(nèi)皮細胞 (HBMEC) ( 5×105 )STREPTAVIDIN鏈霉親合素生物技術(shù)級5MG9013-20-1Frozen

肺平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)4-metxylumbelliferone 5g/10g/25g/100g原裝 Sigma M1381
CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 桃葉珊瑚苷Aucubin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

神經(jīng)小膠質(zhì)細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)甲硝唑Metronidazole質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

鯉魚尾鰭細胞;YZ16 人皮膚基底細胞癌，TE 354.T細胞 Acc-2(涎腺腺樣囊性癌細胞)甲硝唑(標準品)Metronidazole質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品

人急性單核細胞細胞;THP-1乙酰哈巴苷8-O-Acetylharpagide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標準品

ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人細胞裂解液 (陽性對照) 黃決明素Chrysoobtusin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
中間普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒REG3B Others Mouse 小鼠 REG3B / Pap1 人細胞裂解液 (陽性對照) MG132,蛋白酶體抑制劑MG-132質(zhì)量規(guī)格：>98%，proteasome抑制劑

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BPD184352 (CI-1040)PD-184352 (CI-1040)質(zhì)量規(guī)格：>99%,MEK1/2抑制劑

NCI-H520細胞，人肺鱗癌細胞 小鼠間質(zhì)細胞瘤細胞,MLTC-1細胞 CM-R023大鼠管內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL2-脫氧-D-葡萄糖2-Deoxy-D-glucose質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

QGY-7701(人細胞) 5×106cells/瓶×2坎地沙坦Candesartan質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

Promocell C-28040 Pericyte Growth Medium, 周細胞生長培養(yǎng)基 500mlRuxolitinib(INCB018424) phosphateINCB018424) phosphate質(zhì)量規(guī)格：>98%,JAK1/2抑制劑