PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
雷氏普羅威登斯菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng)：雷氏普羅威登斯菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱(chēng)：Providencia rettgeri
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
tTA基因修飾的小鼠(B類(lèi));P19-CAG-tTA-1D3 膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL3'-對(duì)羥基紫杉醇質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口3'-p-Hydroxy Paclitaxel

SK-MEL-1, 人皮膚色素瘤細(xì)胞 Human紫杉醇-d5質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Paclitaxel-d5

BCHE Others Human 人 BCHE / CHE1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 7-差向紫杉酚質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口7-epi-Taxol

人小氣道上皮細(xì)胞RNAHSAEpiC miRNA5 μg紫杉醇C質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Paclitaxel C

SEMA5A Others Human 人 SEMA5A / Semaphorin-5A / SEMAF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-羥基-7-差向-紫衫醇質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-hydroxy-7-epi-paclitaxel
腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-葡萄糖醛酸-r-內(nèi)酯，英文名或英文縮寫(xiě)：D-Glucurone，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：1克

人海馬神經(jīng)元 人細(xì)胞，NCI-H226[H226]細(xì)胞 P388D1(瘤細(xì)胞)(S)-(+)-同洛芬 (S)-(+)-Kqtoprofqn 161-81-2

人色素瘤細(xì)胞;A875L-溶血卵鱗脂(冷藏運(yùn)輸) Lysophosphctidylcholinq 9008-30-4

AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) CAPSOFREEACIDCAPSO超級(jí)25G73463-39-5RT

大鼠腦細(xì)胞;C64975-73-9N,N’-二環(huán)己基-4-嗎啉脒N,N'-Dicyclohexyl-4-morpholinecarboxamidine
人顱骨造骨細(xì)胞 (HCO) ( 5×105 ) NRK-52E，大鼠腎細(xì)胞 Rattus芴甲氧羰酰氯（Fmoc-Cl）Fmoc chloride質(zhì)量規(guī)格：用于HPLC衍生化,≥99.0% (HPLC)

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B5氟羅里硅土(農(nóng)殘級(jí))Florisil®質(zhì)量規(guī)格：農(nóng)殘級(jí)

人小腦顆粒細(xì)胞 (HCGC)( 5×105 )合成硅酸鎂吸附劑(250-125um)Magnesium silicate adsorbent(Synthetic)質(zhì)量規(guī)格：250-125um

Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)吡氟禾草靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.101mg/ml)Fluazifop-P-butyl solution質(zhì)量規(guī)格：0.101mg/ml

人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;D341Med 大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL惡唑酮菌(標(biāo)準(zhǔn)品) Famoxadone solution質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%
雷氏普羅威登斯菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒人胚胎成纖維樣細(xì)胞;HEH2 人子宮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2'-脫氧鳥(niǎo)苷-3'-單1酸二鈉2'-Deoxy-3'-guanylic acid di salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生HEK-nN-乙酰-DL-甲硫氨酸N-Acetyl-DL-mine質(zhì)量規(guī)格：0.99

RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DL-高半胱氨酸DL-Homocysteine 質(zhì)量規(guī)格：0.95

大鼠直腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL間氟-DL-酪氨酸m-Fluoro-DL-tyrosine 質(zhì)量規(guī)格：0.99

BHK-21 [C-13]倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞 BHK-21 [C-13] hamster kidney fibroblast cells MEM培養(yǎng)基10%FBS鈣蛋白酶抑制劑I(進(jìn)口)Calpain Inhibitor I(ALLN) 質(zhì)量規(guī)格：≥95%,美國(guó)進(jìn)口

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。