產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：黑色普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Prevotella melaninogenica
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
黑色普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系 牛胚氣管細(xì)胞,EB細(xì)胞 Hs 578T(人成纖維細(xì)胞)硅膠Hshēng huà shì jì容量：10KU

小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1姆沙伯 105 CHROMOSORB(R) 105 682-91-9

IL6R Others Mouse 小鼠 IL6RA / CD126 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 聚聚酮 Poly(vinylpolypyrrolidone) [PVPP] 25249-54-1 100G 通用試劑

人T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,E二氧化鉑shēng huà shì jì容量：500毫克

BCAM Others Mouse 小鼠 BCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Dextrin 100g/500g原裝 Sigma D2131
人癌細(xì)胞;SK-BR-3 大鼠肝星形細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLDMSO二甲亞砜5克色固，99%

C127 小鼠細(xì)胞三基十四烷溴化銨 Cqtrimidq 1119-97-7

FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4-基馬尿酸鈉shēng huà shì jì容量：RT25克

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化)3Cprotease3C蛋白酶5克BR

IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (4-錄-1-酚)
小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2頭孢唑啉,唑啉頭孢菌素Cefazolin質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

SPN Others Rat 大鼠 SPN / CD43 / Sialophorin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 頭孢唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefazolin質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0165NCI-H1299(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2文多靈(標(biāo)準(zhǔn)品）Vindoline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

L129細(xì)胞，NCTC克隆929細(xì)胞 人Butt`s瘤細(xì)胞,Raji細(xì)胞 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Theophylline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

AGS(人胃腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2苯甲酰新烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Benzoylmesaconine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
黑色普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒人成纖維細(xì)胞;HFFSB1317,TG02SB-1317,TG-02質(zhì)量規(guī)格：>97%,CDKs/JAK2 / FLT3抑制劑

TGFBR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) PD0325901PD-0325901質(zhì)量規(guī)格：>99%,ATP非競(jìng)爭(zhēng)性的MEK抑制劑

F344大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells西他塞坦鈉/司他生坦鈉Sitaxsentan ; TBC-11249; Thelin質(zhì)量規(guī)格：度99%

NW38細(xì)胞，人色素瘤細(xì)胞 鼠李糖乳桿菌 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251西他塞坦鈉/司他生坦鈉Sitaxsentan ; TBC-11250; Thelin質(zhì)量規(guī)格：度99%

ANGPT2 Protein Mouse 重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 (His 標(biāo)簽)西他塞坦鈉/司他生坦鈉Sitaxsentan ; TBC-11251; Thelin質(zhì)量規(guī)格：度99%