產品參數：
產品僅供科研使用產品名稱：肺孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Pneumocystis spp.
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
肺孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
EDAR Others Human 人 EDAR / DL 人細胞裂解液 (陽性對照) xyleolOrangetetrawo7iumsalt兒價分桔黃四鈉5克高

人裂解物HPFL聯本安;隊二安基聯本;4,4′-二安基聯本 Bqnzidinq;p-DicMinodiphqnyl;p,p′-Bicnilinq 9-87-2

CXADR Others Human 人 CXADR / CAR 人細胞裂解液 (陽性對照) Di-n-octylamine二辛基胺100毫克BR，98%

BNL CL.2 小鼠胚胎肝細胞AMPHOTERICINB,SOLUBILIZED可溶性兩性霉素B組織培養級1GCOLD

CL-0134KU812(人外周血嗜堿性細胞)5×106cells/瓶×2(噻唑藍)
COS-7(非洲綠猴SV40轉化的腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0182P815(小鼠肥大細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2 正常大鼠腎細胞;NRKElastase彈性硬朊酶5克BR，400u/mg

大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-1Raddeanoside 20 Raddeanoside 20 (HPLC,≥98%) 335354-79-5 5MG 標準品

IL3 Others Rat 大鼠 IL3 / ierleukin 3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 律平 III ≥85% (HPLC) FILIPIN III 480-49-9

T-101A胰蛋白酶(含10mL 酶解緩沖液)1mL聯大茴香，英文名或英文縮寫：3,3'-Dimetxoxybenzidine，級別：BR，4%，規格：1克

A549, 人細胞系 T細胞細胞,HPB-ALL細胞 RKO(腺癌細胞)過氧二鉀NA
CL-0171NIH/3T3(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2溴化新斯的明(標準品)Neostigmine bromide質量規格：>98%,標準品

人癌細胞;MDA-MB-468 大鼠小腦顆粒細胞完全培養基 100mL木蘭脂素Magnolin質量規格：HPLC≥98%，標準品

Pcc4 小鼠消旋山莨菪堿Racanisodamine質量規格：HPLC≥98%，標準品

SIRPG Others Human 人 SIRPG / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺間二甲氧嘧啶鈉Sulfadimethoxine  salt質量規格：>98%

新生兒細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)磺胺間二甲氧嘧啶鈉(標準品)Sulfadimethoxine  salt質量規格：>98%,標準品
肺孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒MG-63 人成細胞2'-甲氧基尿苷2’-OMe Uridine質量規格：>98%,BR

SK-MES-1人肺鱗癌細胞 SK-MES-1 human lung squamous carcinoma cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBSTES. Na;2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸鈉TES 質量規格：>99%,AR

EPO Protein Rat 重組大鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 標簽)TES；Tris乙磺酸,2-[（三（羥甲基）甲基）氨基]-1-乙磺酸TES質量規格：>99%,AR

SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17 人上皮細胞完全培養基 100mL3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸鈉TAPSO mono質量規格：>98%,BR

人導管瘤細胞;UACC812TAPSO；3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸TAPSO質量規格：>99%,BR