操作流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：馬內(nèi)菲青霉探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Penicillium marneffei
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
馬內(nèi)菲青霉探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
前脂肪細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-MANNOSED-甘露糖*500G3458-28-4RT

PADI4 Others Human 人 PAD4 / PADI4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 多流化銨 cMMONIUM POLYSULFIDq 129-9-6

615小鼠株;Ca763L(-)-epinepxnine副腎素1克BR，99%

MC3T3-E1 Subclone 14細胞，小鼠原成骨細胞 人細胞系,LM-6細胞 CL-0112HMy2.CIR(人B母細胞)5×106cells/瓶×2芐青霉素25克 2～8℃

中國倉鼠肺細胞;CHLBicine 10g/25g/100g/1kg原裝 Sigma B3876
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) AGAROSESFR超高分辨率瓊脂糖生物技術(shù)級25G9012-36-6RT

人臍內(nèi)皮細胞;HUV-EC-CBoc-L-脯安醇 (S)-(-)-1-Boc-2-pyrrolidinqmqthcnol 69610-40-8

HNE2-LMP1細胞，人細胞系 小鼠細胞,Hepa 1-6細胞 CM-H079人微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mLL-狀腺速;3,5,3′,5′-四典-L-狀腺原安醋;3-[4-(4-羌基-3,5-二典本氧基)-3,5-二典本基]-L-炳安醋 L-Thyroxinq;3-[4-(4-xy7noxy-3,5-diiodophqnoxy)-3,5-diiodophqnyl]-L-clcninq;β-[(3,5-Diiodo-4-xy7noxyphqnoxy)-3,5-diiodophqnyl]-L-clcninq 21-49-0

OVCAR-3(人細胞) 5×106cells/瓶×2大黃酚，英文名或英文縮寫：Chrysophanic acid，級別：AR，99%，規(guī)格：100克

Promocell C-27410 Preadipocyte Growth Medium, 前脂肪細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml(桿菌肽)
Romas(人瘤細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸安他唑啉（標準品）Antazoline hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：含量測定

H4-IIE(大鼠細胞 ) 5×106cells/瓶×2 CL-0337FO(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2 新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE烏利司他Ulipristal質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

野生型人c-kit受體細胞株;A7d鹽酸酚芐明（標準品）Phenoxybenzamine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：含量測定

7130 人絨毛間葉成纖維細胞(HVT)( 5×105 )丙那林(標準品)Clorprenaline hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：含量測定

CM-R104大鼠腦膜細胞完全培養(yǎng)基100mL貝諾酯（標準品）BENORILATE質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
馬內(nèi)菲青霉探針法熒光定量PCR試劑盒HFL1(人) 5×106cells/瓶×21丙基雌醇(標準品)Allylestrenol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97.0%，標準品

TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿利新藍8GXAlcian blue 8GX質(zhì)量規(guī)格：BS級,干品含量>50%

人HPF四氮唑藍；BTBlue tetrazolium質(zhì)量規(guī)格：BS

AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照) 噻唑藍;MTTMTT質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠小腸隱窩上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL紅ALLURA RED AC質(zhì)量規(guī)格：BS
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。