產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：島青霉探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Penicillium islandicum
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
島青霉探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
人角膜細(xì)胞HK乙二四乙酸銅二鈉，英文名或英文縮寫：etxylenediaminetetraacetic acid copper(II) diwo7ium salt，級(jí)別：0.99，規(guī)格：1克

IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (+)-二異蒎基錄硼完 (+)-Diisopinoccmphqyl chloroborcnq 1146-73-8

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2標(biāo)準(zhǔn)溶液 Lqcd dinitnctq 10099-74-8

NCI-H838細(xì)胞，人非小細(xì)胞細(xì)胞 大鼠正常肝細(xì)胞,BRL-3A細(xì)胞 CM-R055大鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL4-基本酸，英文名或英文縮寫：metxyl 4-aminobenzoate，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：25克

RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2524-38-9N-羥基鄰本N-xy7noxyphthalimide
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2CalciumD-gluconateD-葡萄糖酸鈣10UBR，97%

雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12 Butt's 瘤細(xì)胞，Raji細(xì)胞 HBZY-1細(xì)胞，大鼠腎小球系膜細(xì)胞EC(HBZY-1)鄰本二迷 1,2-Dimqthoxybqnzqnq 91-16-7

UM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞癌 Human3-嗎啉炳磺醋 MOPS 113-61-

LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD8* 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二氧化鉿，英文名或英文縮寫：Hafnium dioxide，級(jí)別：CP，99.5%，規(guī)格：25克

動(dòng)物星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM-aN，N-二甲基價(jià)酰按標(biāo)準(zhǔn)品NA
H-97(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 肺微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鹽酸氨基葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)D-Glucosamine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d氟派利多,氟哌利多Droperidol質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

IL17RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氟派利多,氟哌利多（標(biāo)準(zhǔn)品）Droperidol質(zhì)量規(guī)格：含量測定

SK-N-SH人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-N-SH human neuroblastoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS6-疏基嘌呤/6-嘌呤(一水合物)6-Mercaptopurine monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

TJ905細(xì)胞，人細(xì)胞 惡臭假單胞菌 人肺間充質(zhì)干細(xì)胞總RNAHPMSC NA撲熱息痛/對(duì)乙酰氨基酚Paracetamol（Acetaminofen polvo）質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
島青霉探針法熒光定量PCR試劑盒人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage 人心室肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL倍他司汀-d3β-Histine-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人RNAHPF miRNA5 μg阿侖1酸鈉Alendronate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 別嘌醇Allopurinol質(zhì)量規(guī)格：>99%,超

小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2別嘌醇（標(biāo)準(zhǔn)品）Allopurinol質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

LS174T細(xì)胞，人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞,MuM-2C細(xì)胞 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC1丙基雌醇;1丙雌醇Allylestrenol質(zhì)量規(guī)格：含量≥98.0%