產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：雙埃柯病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Parechovirus(PeV)
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
雙埃柯病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
MFC細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 BHK(幼倉鼠腎細(xì)胞) 獼猴肺細(xì)胞;MML2N2-異丁酰基鳥苷一水合物質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRibu-rG

XCL1 Protein Mouse 重組小鼠 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)N4-苯甲酰胞苷質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBz-rC

RBE(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N6-苯甲酰基腺苷質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBz-rA

人小細(xì)胞細(xì)胞;NCI-H209N-乙酰-2'-脫氧-胞苷質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAc-dC

PTGFRN Others Cynomolgus 食蟹猴 EWI-F / PTGFRN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-疊氮-1-*基乙酰-D-赤-鞘氨醇質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口2-Azido-1-pivaloyl-D-erythro-Sphingosine
CL-0227T-24(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2碳酸鋇25克

人細(xì)胞;5637(HTB-9) 大鼠神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLDL-絲酸鹽酸鹽 DL-Serine methyl ester hydrochloride,... 5619-4-5 5G 通用試劑

N-H 小鼠細(xì)胞典海醇 Iohqxol 66108-92-0

LYPD3 Others Human 人 LYPD3 / MIG-C4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 諾納德P40500克

非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-173049-73-7胰蛋白胨;胰化蛋白胨Tryptone
ACVR1B Others Human 人 ALK4 / ACVR1B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸布比卡因（標(biāo)準(zhǔn)品）Bupivacaine Hydrochloride Monohydrate質(zhì)量規(guī)格：含量測定

胰腺星狀細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)雙環(huán)醇（標(biāo)準(zhǔn)品）Bicyclol質(zhì)量規(guī)格：含量測定

IRAK4 Others Human 人 IRAK4 / IRAK-4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸貝尼地平（標(biāo)準(zhǔn)品）Benidipine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：含量測定

大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J甲異靛（標(biāo)準(zhǔn)品）Meisoindigo質(zhì)量規(guī)格：供UV法含量測定用

MCF7細(xì)胞，癌細(xì)胞 人細(xì)胞,QGY-7701細(xì)胞 T-108B膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL鹽酸丁螺環(huán)酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Buspirone Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：含量測定
雙埃柯病毒探針法熒光定量PCR試劑盒WL1(大鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml鹽酸羅格列酮Rosiglitazone HCL 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞總RNAHPASMC NA阿托伐他汀叔丁基酯Atorvastatin tert-Butyl Ester 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

PLA2G2E Others Mouse 小鼠 PLA2G2E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿托伐他汀甲酯Atorvastatin Methyl Ester質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

U973 人細(xì)胞氮卓斯汀-13C,d3Azelastine-13C,d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CL-0344HAN(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N-去甲氮卓斯汀N-Desmethyl Azelastine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口