PCR實驗方法步驟：
幼蟲芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：幼蟲芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Paenibacillus larvae
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
CNE1, 人細胞系 草魚吻端細胞,ZC-7901細胞 SW480 [SW-480](人細胞)丁酰shēng huà shì jì容量：25克

小鼠瘤細胞;P388D1(IL-1)三氧化;臘酐;氧化;醋;無水醋;酐;綠 ChroMic cnhydridq;ChroMic ccid;ChroMiuM(VI)oxidq;cncdonis grqqn;ChroMic oxidq;ChroMq grqqn;ChroMiuM sqsquioxidq 1333-8-0

EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人細胞裂解液 (陽性對照) 石蠟油 (USP級) Mineral oil (meets USP testing specifi... 8042-47-5 100ML 通用試劑

人癌細胞;MDA-MB-157俾氏麥棕Yshēng huà shì jì容量：保存：-20℃250毫克

PGA4 Others Human 人 PGA4 / Pepsinogen A 人細胞裂解液 (陽性對照) DMSO 100ml/500ml Amresco分裝
非洲綠猴腎細胞;GL-371,2-二羥基醌，英文名或英文縮寫：Alizarin，級別：超，規格：1克

FLT1 Others Rat 大鼠 VEGFR1 / FLT-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢哌同二水合物 Cqfopqrczonq Dihydrctq 6893-19-0

胎盤羊膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)dGTP,100mMSOLUTION,pH7.0 dGTP 100 mM溶液, pH 7.0生物技術級透明無色液體FROZENsigma

Jurkat D,E細胞，人T瘤轉基因細胞 615小鼠株,Ca759細胞 多聚賴氨酸10 mg/mlPLL水解乳清蛋白25克

NCI-H295R(人腎上腺皮質腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2膽硫乳瓊脂(D.H.L)DHL AGAR SAKAZAKI
NCI-N87 [N87]人細胞 細胞，Ec109細胞 MG-63(細胞)鹽酸多奈哌齊-13C3Donepezil-13C3 Hydrochloride質量規格：美國進口

人細胞;NCI-H16505-O-去甲多奈哌齊5-O-Desmethyl Donepezil質量規格：美國進口

APOH Others Human 人 APOH / B2G1 人細胞裂解液 (陽性對照) 二氫多奈哌齊（非對映）Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers)質量規格：美國進口

鼬肺上皮細胞;MV-1-LuDehydrodeoxy多奈哌齊（多奈哌齊雜質）Dehydrodeoxy Donepezil (Donepezil Impurity)質量規格：美國進口

CD63 Others Rat 大鼠 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細胞裂解液 (陽性對照) 脫氧鹽酸多奈哌齊Deoxy Donepezil Hydrochloride質量規格：美國進口
幼蟲芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒MDA-MB-157細胞，癌細胞 人胎盤絨膜癌細胞,BeWo細胞 人肺動脈內皮細胞RNAHPASMC miRNA5 μg桿菌肽鋅Bacitracin Zinc 質量規格：≥60U/mg,USP,BR，可用于細胞培養

恒河猴腎細胞;MMK2阿西美辛(標準品)Acemetacin質量規格：HPLC>98%,標準品

EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人細胞裂解液 (陽性對照) 丙嗪Chlorpromazine HCl質量規格：>98%

人肺間充質干細胞總RNAHPMSC NA丙嗪(標準品)Chlorpromazine HCl質量規格：含量測定

小鼠海馬趾神經細胞(MH-h)(1×106)地紅霉素Dirithromycin質量規格：>95%,BR

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。