操作流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：細刺奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Ostertagia leptospicularis
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
細刺奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
牛腎細胞;MDBKFerricxy7noxide有水氧化鐵1克2.7N，99.7%

GUCA1A Others Human 人 GCAP1 / GUCA1A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 3,3-二氧基聯(lián)本安二言醋鹽 3,3'-Dimqthoxybqnzidinq dixy7nochloridq 032-40-0

腎系膜細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)D-Tryptophanmetxylesterxy7nochlorideD-色酸鹽酸鹽5克BR，98%

團頭魴尾鰭細胞;WCF 人卵巢，PA-1細胞 SK-OV-3(細胞)(R)--Leucinol(R)-2-基-4-甲基-1-5克BR，98%

人皮膚色素瘤細胞;SK-MEL-169-93-2尿酸Urea;8-xy7noxyxanthine;2,6,8(1,3,9)-Purinetrione;7,9-Dixy7no-1H-purine-2,6,8-(3H)-trione
魚源細胞 人細胞，Hep 3B2.1-7[Hep 3B;Hep-3B;Hep3B]細胞 JAR(胎盤絨毛癌細胞)D-色酸鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：D-Tryptophan metxyl ester xy7nochloride，級別：BR，98%，規(guī)格：5克

人B細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)1,2,4-三基本 1,2,4-Trimqthylbqnzqnq 92-63-6

CD1d1 Others Mouse 小鼠 CD1D / R3G1 人細胞裂解液 (陽性對照) 分子篩3A型 MOLqCULcR SIqVqS 308080-99-1

非洲綠猴腎細胞;VERO-76有機硅消泡劑，英文名或英文縮寫：Silicone defoamer，級別：AR，99%，規(guī)格：5克

KDR Others Human 人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-酸-王樹脂NA
原代骨骼肌細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml鹽酸鑭六水(>99%,BR)Lanthanum (III) chloride, hexahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

ROBO4 Others Human 人 ROBO4 人細胞裂解液 (陽性對照) 三氧化鉬(>98%,BR)Molybdic oxide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

MDCK 狗腎細胞木瓜蛋白酶懸浮液Papain 2x crystallized from papaya Latex質(zhì)量規(guī)格：比活度：>20 U/mg，BC

散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21苯磺酸鈉(>98%，BR) benzenesulfonate質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

U-2 OS, 人細胞過氧化物歧化酶(SOD)Superoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD)質(zhì)量規(guī)格：比活度：>5000 U/mg,BC
細刺奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒人肺細胞;HLF-a2-芐基咪唑啉2-Benzylimidazoline質(zhì)量規(guī)格：美國進口

GFRA1 Others Canine 狗 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照) Amidopyrine/aminopyrine質(zhì)量規(guī)格：>98%,AR

恒河猴腎細胞;MMK3緊張素IIAngiotensin II質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BR

Ls-174-T細胞，人細胞 人色素瘤細胞,SK23細胞 人細胞;Hela維生素 D3 ((膽骨化醇)Vitamin D3質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)4000萬IU/g

HCCC-9810(人肝內(nèi)細胞) 5×106cells/瓶×2帕唑帕尼鹽酸鹽Pazopanib HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。