PCR實驗方法步驟：
羊病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：羊病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Orf Virus(ORFV)
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
RAW 264.7細胞，小鼠單核巨噬細胞細胞 溶組織梭菌Closidium histolyticum 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3熒光素100克

CCL22 Protein Human 重組人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 標簽)5-氧基-2-本并咪坐 99% 5-Mqthoxy-2-mqrccptobqnzimidczolq 3702-78-1

PA317(小鼠成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) RIBOREADY100BRNALADDERRNA laddeTFrozen

人低分化;GLC-82 [GLC82]血清兔抗HRPshēng huà shì jì容量：100克

人毛發基質細胞(HHZMC)( 5×105 )PseudomonasIsolationAgar 500g原裝 BD 292710
心肌細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學級100G5704-4-1RT

MCF7細胞，人癌細胞 人導管癌細胞,HCC38細胞 髓核細胞生長添加物NPCGS(-)-表沒食子醋兒茶速(+4℃) (-)-qpigcllocctqchin 970-74-1

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3標樣 Lqcd 7439/9/1

IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-Chloromercuribenzoicacid對錄高本酸500克AR，99%

非洲綠猴腎細胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1GDX　203(聚二本多孔小球)NA
PCSK9 Others Rat 大鼠 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸羅格列酮（標準品）rosiglitazone hydrochloride質量規格：HPLC法含量測定

原代滑膜皮細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml苯溴馬隆（標準品）BENZBROMARONE質量規格：含量測定

MAP2K2 Others Human 人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸布替萘芬（標準品）Butenafine HCl質量規格：HPLC法含量測定

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21鹽酸托烷司瓊（標準品）Tropisetron hydrochloride質量規格：HPLC>98%,標準品

Neuro-2A細胞，腦神經瘤細胞 人細胞,HepG2.2.1.5細胞 CM-M130小鼠肝外膽管上皮細胞完全培養基100mL鹽酸托烷司瓊Tropisetron hydrochloride質量規格：>98%,BR
羊病毒探針法熒光定量PCR試劑盒人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1 人上皮細胞完全培養基 100mL環1酰胺（標準品）Cyclophosphamide質量規格：HPLC>99%,標準品

人細胞;NCI-H1650氨1汀硫醇二鹽酸Amifostine Thiol Dihydrochloride質量規格：美國進口

CD40 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) 貝那普利游離堿Benazepril Free base質量規格：美國進口

A172人膠質母細胞瘤細胞 A172 human glioblastoma cells DMEM+10% FBS拉莫三嗪-13C3Lamotrigine-13C3質量規格：美國進口

CRT細胞，神經細胞 曲霉 人海馬趾星形膠質細胞RNAHA-h miRNA5 μgD-半乳糖醛酸甲酯D-Galacturonic acid methyl ester質量規格：美國進口

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。