PCR實驗方法步驟：
西方蜜蜂微孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：西方蜜蜂微孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Nosema apis
產品規(guī)格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
U-2 OS-EGFP+puro人細胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS-EGFP+puro McCoy's 5A+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin多聚半乳糖醛酸shēng huà shì jì容量：100克

CD40LG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)錄化;六水三錄化 CHROMIUM (III) CHLORIDq 1002-73-7

人視網膜內皮細胞 (HREC)( 5×105 ) HBE, 正常人上皮細胞系 Human潤濕劑 P-40 Nonidet P 40 Substitute (NP 40)  100ML 通用試劑

人成纖維細胞總RNAHMF NA菠蘿蛋白酶shēng huà shì jì容量：RT10克

IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細胞裂解液 (陽性對照) D-Mannitol 250g/500g/2.5kg/5kg 國產
人導管癌細胞;ZR-75-30 大鼠腦平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLHA腐植酸5克CP，98%

NFS-60 小鼠細胞G-CSF依賴性2-肖基隊亞本基二安 1,4-Dicmino-2-nitnobqnzqnq 2307-14-

VTN Others Mouse 小鼠 Vionectin / VTN 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-安基巴豆醋酯 Mqthyl 3-cminocrotonctq 1402-39-1

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A細菌蛋白胨shēng huà shì jì容量：5克

SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細胞裂解液 (陽性對照) (酪蛋白)
原代平滑肌細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml鹽酸美西律（標準品）Mexiletine Hydrochloride質量規(guī)格：含量測定

LYN Others Human 人 Lyn Kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 美洛西林鈉Mezlocillin 質量規(guī)格：>96%,CP,BR

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0906美洛西林鈉(標準品)Mezlocillin 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

CFPAC-1細胞，細胞 細胞系,SUNE-1亞株-5-8F細胞 CL-0322Beta-TC-6(小鼠瘤胰島β細胞)5×106cells/瓶×2米非司酮Mifepristone質量規(guī)格：>98.5%,BR

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6米非司酮（標準品）Mifepristone質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
西方蜜蜂微孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒人肝竇內皮細胞HHSEC6-嘌呤-2'-脫氧核苷6-Mercaptopurine-2'-deoxyriboside質量規(guī)格：美國進口

SERPINA6 Others Human 人 SerpinA6 / CBG 人細胞裂解液 (陽性對照) 奧美拉唑砜Omeprazole Sulfone質量規(guī)格：美國進口

HSF 人皮膚成纖維樣細胞奧美拉唑N-氧化物Omeprazole N-Oxide質量規(guī)格：美國進口

CM-H131人角膜成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL4-去甲氧基-4-硝基奧美拉唑硫化物4-Desmethoxy-4-nitro Omeprazole Sulfide質量規(guī)格：美國進口

QGY-7701, 人細胞5-羥基奧美拉唑鈉鹽5-Hydroxy Omeprazole  Salt質量規(guī)格：美國進口

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。