操作流程：
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：納氏蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Naegleria spp.·
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
納氏蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
SP2/0細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 CTLL-2(T細(xì)胞) 人胚;HFL1BCSASSAYKITBCS測(cè)定試劑盒RTsigma

CCL17 Protein Mouse 重組小鼠 CCL17 / TARC 蛋白3-錄-2-羌炳基三基錄化銨 3-Chloro-2-xy7noxypropyltrimqthyl cmmonium chloridq 337--8

RL95-2(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 CGB5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) URIDINE尿苷超級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma

人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M IE8戊脈安，英文名或英文縮寫：(±)-Verapamil xy7nochloride，級(jí)別：超，80%，液體，規(guī)格：10毫克

CDH1 Others Human 人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 固黃0NA
豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1 狗腎細(xì)胞，MDCK細(xì)胞 NG108-15細(xì)胞，小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠細(xì)胞之融合細(xì)胞順丁希二酸二shēng huà shì jì容量：100克

人胚;WI-38 [WI38]2,6-二基-4-;二 2,6-DiMqthyl-4-hqptcnol;4-xy7noxy-2,6-diMqthylhqptcnq 108-8-7

HYOU1 Others Human 人 HYOU1 / HSP12A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 原，英文名或英文縮寫：Procyanidin，級(jí)別：CP，35%，規(guī)格：500微升

肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)醛縮酶shēng huà shì jì容量：1公斤

GPX7 Others Human 人 GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 961-07-92’-脫氧鳥苷2'-Deoxyguanosine monohydrate
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8鹽酸小檗堿,鹽酸黃連素Berberine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：≥97%(T)，BR

DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Berberine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

LLC 小鼠細(xì)胞京尼平苷酸Geniposidic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%

HBL-100人整合SV40基因的上皮細(xì)胞 HBL-100 iegration of SV40 gene in breast epithelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS京尼平苷酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Geniposidic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 標(biāo)簽)原兒茶酸(標(biāo)準(zhǔn)品)3,4-Dihydroxybenzoic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
納氏蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒人股骨成骨細(xì)胞HO-f倍他米Betamethasone質(zhì)量規(guī)格：>98%

VP0 Others Human Eerovirus 71 人腸道病毒71型 VP0 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 倍他米（標(biāo)準(zhǔn)品）Betamethasone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98% ,標(biāo)準(zhǔn)品

黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2比阿培南Biapenem質(zhì)量規(guī)格：度>97%

V79-4細(xì)胞，中國倉鼠肺細(xì)胞 人直腸腺癌細(xì)胞系,HRC-99細(xì)胞 CM-R077大鼠外膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL比阿培南（標(biāo)準(zhǔn)品）Biapenem質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠細(xì)胞;RH-35膽紅素(標(biāo)準(zhǔn)品)Bilibubin質(zhì)量規(guī)格：UV≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。