PCR實驗方法步驟：
細小病毒19探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：細小病毒19探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Parvovirus B19(PVB19)B19
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
Ha Fe細胞，羊膜細胞 人高分化腺癌細胞系,THC-8307細胞 CM-R045大鼠小腸粘膜上皮細胞完全培養基100mL乙二安四乙酸三鉀鹽5毫克

大鼠肝細胞;BRL 3AD-谷酸 D-Glutamic acid,≥99% 6893-26-1 5G 通用試劑

MICB Others Human 人 MICB 人細胞裂解液 (陽性對照) 區醋 Kojic ccid 201-30-4

人絨毛膜間充質基質細胞HCMSC1，3-500克

FLRT2 Others Human 人 FLRT2 人細胞裂解液 (陽性對照) 本甲酰錄(*)Benzoyl chloride
非洲綠猴腎細胞;BS-C-1錫粒25克

RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細胞裂解液 (陽性對照) L-賴酸醋酸 L-Lysine acetate salt (HPLC,≥98%) 57282-49-2 5G 通用試劑

人氣管上皮細胞完全培養基 100mL厄貝沙坦 Irbqscrtcn 13840-11-6

UM細胞，人葡萄膜色素細胞 土曲霉 人細胞;MKN-45三本基氧化膦1克RT

ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標簽)100587-90-4醋酸鑭LANTHANUM ACETATE HYDRATE
Lec1倉鼠卵巢細胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培養基(GIBCO)+10%FBS鹽酸丙卡巴肼/鹽酸甲基芐肼Procarbazine HCl質量規格：>98.5%,USP,BR,可用于細胞培養

IGFBP5 Protein Canine 重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標簽)鹽酸丙卡巴肼(標準品)Procarbazine HCl質量規格：HPLC>98%,標準品

EB (NBL-4) (牛胚氣管細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠垂體細胞RPC鹽酸丙卡特羅Procaterol HCl質量規格：>98.5%,CP2005,半水合物

胰腺導管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)丙泊酚Propofol質量規格：>98.0%,熔點18

FCGR3A Others Rat 大鼠 CD16a / FCGR3A 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸雷洛昔芬Raloxifene HCl質量規格：>98.5%,BR
細小病毒19探針法熒光定量PCR試劑盒PA317細胞，小鼠胚成纖維包裝細胞 6T-CEM(T細胞) 大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-12-羥基阿托伐他汀內酯-d52-Hydroxy Atorvastatin Lactone-d5質量規格：美國進口

EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標簽)阿替洛爾（標準品）Atenolol質量規格：含量測定,HPLC>99%,標準品

A-427(人細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9阿托伐他汀鈣Atorvastatin calcium質量規格：>98.5%,BR,可用于細胞培養

人肺動脈內皮細胞總RNAHPAEC NA阿托伐他汀鈣(標準品)Atorvastatin calcium質量規格：HPLC>98%,標準品

小鼠周神經成纖維細胞(MPNF)(5×105)阿扎胞苷/5-氮雜胞嘧啶核苷(進分)Azacitidine (5-Azacytidine)質量規格：> 98%,進分,Sigma A2385

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。