PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
微黃細(xì)頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：微黃細(xì)頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Nematodirus helvetianus
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
細(xì)胞名稱 種屬1克AR，99.5%

AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) [2-(基炳1酰氧)基]二基-(3-磺炳基)輕氧化銨 3-[Dimqthyl-[2-(2-mqthylprop-2-qnoyloxy)qthyl]czcniumyl]propcnq-1-sulfonctq 3637/6/1

人骨骼肌成肌細(xì)胞總RNAHSkMM NAL-Histidine(S)-2-基-3-(4-咪唑基)酸10克BR，99%

HSPA1A Others Human 人 HSP70 / HSPA1A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Bariumchromate902鋇黃100克BR，98%

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A¤;;Wood alcohol
肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-山梨醇shēng huà shì jì容量：25克

Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 (aa 1-725) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 言醋-4，4-聯(lián) 4,4'-DIPYRIDYL DIxy7noCHLORIDq 796-7-3

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2DL-2-基shēng huà shì jì容量：1公斤

293T細(xì)胞，SV40永生化的人胚腎上皮細(xì)胞 蚊子細(xì)胞,C6/36細(xì)胞 CL-0250801-D (人巨細(xì)胞性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2三嶙酸脫氧核糖核苷酸shēng huà shì jì容量：RT50克

ZR-75-1(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2613-45-62.4-二甲氧基2,4-Dimetxoxy
U-937細(xì)胞，組織細(xì)胞瘤細(xì)胞 低分化細(xì)胞系,SUNE-1細(xì)胞 CL-03142V6.11(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸雙環(huán)胺（標(biāo)準(zhǔn)品）DICYCLOMINE HYDROCHLORIDE質(zhì)量規(guī)格：供TCL鑒別用

敘利亞倉鼠細(xì)胞系;Syrian Hamster AV12氯解1定（標(biāo)準(zhǔn)品）2-Pyridinealdoxime methochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定

MBL1 Others Mouse 小鼠 MBL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸賽庚啶（標(biāo)準(zhǔn)品）CYPROHEPTADINE HYDROCHLORIDE質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定

原代系膜細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml（標(biāo)準(zhǔn)品）Amidopyrine/aminopyrine質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

CDK16 Others Human 人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 沙利度胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Thalidomide質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
微黃細(xì)頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 人細(xì)胞，DU145細(xì)胞 SK-MES-1(人細(xì)胞)白楊素(標(biāo)準(zhǔn)品）Chrysin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品

人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7白楊素Chrysin質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CPM Others Human 人 CPM / Carboxypeptidase M 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 刺芒柄花素（標(biāo)準(zhǔn)品）Formononetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品

人肝星形細(xì)胞RNAHHSteC miRNA5 μg刺芒柄花素Formononetin質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大豆素,黃豆苷元(標(biāo)準(zhǔn)品）Daidzein質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。