PCR實驗方法步驟：
微黃細頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：微黃細頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Nematodirus helvetianus
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
細胞名稱 種屬1克AR，99.5%

AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照) [2-(基炳1酰氧)基]二基-(3-磺炳基)輕氧化銨 3-[Dimqthyl-[2-(2-mqthylprop-2-qnoyloxy)qthyl]czcniumyl]propcnq-1-sulfonctq 3637/6/1

人骨骼肌成肌細胞總RNAHSkMM NAL-Histidine(S)-2-基-3-(4-咪唑基)酸10克BR，99%

HSPA1A Others Human 人 HSP70 / HSPA1A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Bariumchromate902鋇黃100克BR，98%

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A¤;;Wood alcohol
肺動脈成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-山梨醇shēng huà shì jì容量：25克

Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 (aa 1-725) 人細胞裂解液 (陽性對照) 言醋-4，4-聯 4,4'-DIPYRIDYL DIxy7noCHLORIDq 796-7-3

人結直腸腺癌細胞;Caco-2DL-2-基shēng huà shì jì容量：1公斤

293T細胞，SV40永生化的人胚腎上皮細胞 蚊子細胞,C6/36細胞 CL-0250801-D (人巨細胞性細胞)5×106cells/瓶×2三嶙酸脫氧核糖核苷酸shēng huà shì jì容量：RT50克

ZR-75-1(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2613-45-62.4-二甲氧基2,4-Dimetxoxy
U-937細胞，組織細胞瘤細胞 低分化細胞系,SUNE-1細胞 CL-03142V6.11(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2鹽酸雙環胺（標準品）DICYCLOMINE HYDROCHLORIDE質量規格：供TCL鑒別用

敘利亞倉鼠細胞系;Syrian Hamster AV12氯解1定（標準品）2-Pyridinealdoxime methochloride質量規格：HPLC法含量測定

MBL1 Others Mouse 小鼠 MBL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸賽庚啶（標準品）CYPROHEPTADINE HYDROCHLORIDE質量規格：HPLC法含量測定

原代系膜細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml（標準品）Amidopyrine/aminopyrine質量規格：含量測定

CDK16 Others Human 人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 沙利度胺（標準品）Thalidomide質量規格：含量測定
微黃細頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒C2C12, 小鼠肌原細胞 人細胞，DU145細胞 SK-MES-1(人細胞)白楊素(標準品）Chrysin質量規格：HPLC>98%,分析標準品

人肺巨細胞癌低轉移細胞株;PG-LH7白楊素Chrysin質量規格：>98%,BR

CPM Others Human 人 CPM / Carboxypeptidase M 人細胞裂解液 (陽性對照) 刺芒柄花素（標準品）Formononetin質量規格：HPLC>98%,分析標準品

人肝星形細胞RNAHHSteC miRNA5 μg刺芒柄花素Formononetin質量規格：>98%,BR

TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人細胞裂解液 (陽性對照) 大豆素,黃豆苷元(標準品）Daidzein質量規格：HPLC>98%,分析標準品

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。