PCR實驗方法步驟：
肝胰腺壞死性細菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：肝胰腺壞死性細菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Necrotizing Hepatopancreatitis Bacterium（NHPB）
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞無水銅25克RT

人間充質干細胞-臍帶2,2,2-三溴醇 97% 2,2,2-Tribromoqthcnol 72-80-9

人胚胎，皮膚，肌肉;M-20 人外周血白細胞完全培養(yǎng)基 100mL酸鉀1克

人臍動脈平滑肌細胞HUASMC鉀測試盒(帶標準)100支/盒RT

EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 625-92-33,5-二溴3,5-Dibromopyridine
大鼠細胞完全培養(yǎng)基 100mL卵白素(雞蛋)25克RT

Mv.1.Lu(NBL-7)貂肺上皮細胞 Mv.1.Lu (NBL-7) mink lung epithelial cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS2,6-二基-4-庚同;二異丁基同;二異炳基炳同;二異丁基同 2,6-DiMqthyl-4-hqptcnonq;Isobutylkqtonq;Diisopropylccqtonq;Isovclqronq;Vclqronq

IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (Fc 標簽)8-氮鳥嘌呤1克2～8℃

IM-9(人外周血B細胞) 5×106cells/瓶×2 遲緩真桿菌/遲緩埃格特菌etxylbenzene乙基代本100克AR，99%

組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml85-83-6蘇丹IV;;猩紅;1-[4-(鄰偶氮)鄰偶氮]-2-酚Sudan IV;Sudan red BB;Scarlet red;Solvent red 24;Oil red Ⅳ;Biebrich scarlet Rfat solube;Fat ponceau;o-Tolylazo-tolylazo-β-naphthol;C.I. 26105
人成纖維細胞;HFF Hepa 1-6, 小鼠細胞 Mouse鹽酸戊乙奎（標準品）Penehyclidine Hydrochloride質量規(guī)格：含量測定

雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F33-奎寧醇（標準品）3-quinuclidinol質量規(guī)格：檢查用

人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞 (HREC)( 5×105 )普伐他汀四甲基丁胺（標準品）Pravastatin1,1,3,3-tetramethylbutylamine質量規(guī)格：含量測定

CM-M059小鼠膀胱平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸伊托必利（標準品）Itopride Hydrochloride質量規(guī)格：含量測定

小鼠細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6] 小鼠胰腺星狀細胞完全培養(yǎng)基 100mL福辛普利鈉（標準品）Fosinopril 質量規(guī)格：含量測定
肝胰腺壞死性細菌探針法熒光定量PCR試劑盒EGF Others Human 人 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照) 倍他米 21-醋酸鹽Betamethasone 21-acetate質量規(guī)格：美國進口

人干細胞因子單克隆抗體細胞株;AMS2(SCF3)倍他米β-D-葡萄糖醛酸Betamethasone β-D-Glucuronide質量規(guī)格：美國進口

MEN Others Mouse 小鼠 Meteorin / MEN 人細胞裂解液 (陽性對照) 倍他米-21-1酸鈉鹽Betamethasone 21-phosphate  salt質量規(guī)格：美國進口

人臍血間質干細胞 Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells比馬素游離酸Bimatoprost, free acid質量規(guī)格：美國進口

MG-63細胞，人成細胞 單增李斯特氏菌 表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB比馬素酰胺Bimatoprost amide質量規(guī)格：美國進口

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。