PCR實驗方法步驟：
衣阿華支原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：衣阿華支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycoplasma iowae
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2 II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL葡萄糖氧化酶，英文名或英文縮寫：Glucose oxidase，級別：BR，50u/mg，規格：100克

NCI-N87 [N87]人細胞 HumanBqNZqNq R.G RqcG.cCS RqcG.ISO Rqc

IL12RB1 Others Human 人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-硝基本-N-乙酰-β-D-基半乳糖苷，英文名或英文縮寫：GalNAc1-β-PNP，級別：BR，98%，規格：250克

人神經細胞HN鄰硝基乙酰本，英文名或英文縮寫：2'-nitnoacetanilide，級別：BR，規格：500毫克

NPC2 Others Human 人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 人細胞裂解液 (陽性對照) MEndoAgarLES 100g原裝/500g原裝 BD 273610
人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]GinsenosideRg2人參皂甙Rg225克BR

P19細胞，畸胎癌細胞 人感染HCV細胞,HuH7-HCV細胞 CL-0224SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 )5×106cells/瓶×2N,O-雙三硅基酰安 BSc 10416-29-8

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1(≥99.5%,GC) 1975-12-7 100ML 染色劑

FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人細胞裂解液 (陽性對照) D-TyrosineD-β-對羥基本基酸5克BR，99%

肝實質細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Linoleicacid 1g/5g/25g/100g原裝 SIGMA L1268
EFNB2 Others Human 人 EphrinB2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化苦參堿(標準品)Oxymatrine質量規格：HPLC≥98%，標準品

長尾綠猴腎細胞;4647穿心蓮內酯Andrographolide質量規格：>98%,BR

IL21 Others Rat 大鼠 IL21 / Ierleukin 21 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 穿心蓮內酯（標準品）Andrographolide質量規格：HPLC≥98%，標準品

小腸內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芹菜素Apigenin質量規格：HPLC≥97%,BR

獼猴皮膚細胞;MMS7 人胚胎性癌細胞，Cates-1B細胞 MDA-MB-453(癌細胞)芹菜素(標準品)Apigenin質量規格：HPLC≥98%，標準品
衣阿華支原體探針法熒光定量PCR試劑盒EPHA6 Others Mouse 小鼠 EPHA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯氧乙酸鈉(>98%,BR)Phenoxyaceti acid  salt質量規格：>98%,BR

人骨骼肌細胞總RNAHSkMC NA水楊酸苯酯(>98%,BR)Phenyl salicylate質量規格：>98%,BR

EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照) 1脂酶A2Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom質量規格：比活性：>200U/mg，BC

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6對尼泊金丁酯鈉(>98%,USP)p-Hydroxybenzoic acid butyl ester  salt質量規格：>98%,USP

MIApaca-2細胞，人細胞 人成纖維細胞,HT1080細胞 615小鼠瘤株;HP615尼泊金乙酯鈉(>98.5%,BR)p-Hydroxybenzoic acid ethyl ester  salt質量規格：>98.5%,BR

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。