PCR實驗方法步驟：
衣阿華支原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：衣阿華支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycoplasma iowae
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2 II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL葡萄糖氧化酶，英文名或英文縮寫：Glucose oxidase，級別：BR，50u/mg，規(guī)格：100克

NCI-N87 [N87]人細胞 HumanBqNZqNq R.G RqcG.cCS RqcG.ISO Rqc

IL12RB1 Others Human 人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-硝基本-N-乙酰-β-D-基半乳糖苷，英文名或英文縮寫：GalNAc1-β-PNP，級別：BR，98%，規(guī)格：250克

人神經(jīng)細胞HN鄰硝基乙酰本，英文名或英文縮寫：2'-nitnoacetanilide，級別：BR，規(guī)格：500毫克

NPC2 Others Human 人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 人細胞裂解液 (陽性對照) MEndoAgarLES 100g原裝/500g原裝 BD 273610
人結(jié)直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]GinsenosideRg2人參皂甙Rg225克BR

P19細胞，畸胎癌細胞 人感染HCV細胞,HuH7-HCV細胞 CL-0224SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 )5×106cells/瓶×2N,O-雙三硅基酰安 BSc 10416-29-8

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1(≥99.5%,GC) 1975-12-7 100ML 染色劑

FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人細胞裂解液 (陽性對照) D-TyrosineD-β-對羥基本基酸5克BR，99%

肝實質(zhì)細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Linoleicacid 1g/5g/25g/100g原裝 SIGMA L1268
EFNB2 Others Human 人 EphrinB2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化苦參堿(標準品)Oxymatrine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

長尾綠猴腎細胞;4647穿心蓮內(nèi)酯Andrographolide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

IL21 Others Rat 大鼠 IL21 / Ierleukin 21 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 穿心蓮內(nèi)酯（標準品）Andrographolide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小腸內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芹菜素Apigenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%,BR

獼猴皮膚細胞;MMS7 人胚胎性癌細胞，Cates-1B細胞 MDA-MB-453(癌細胞)芹菜素(標準品)Apigenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
衣阿華支原體探針法熒光定量PCR試劑盒EPHA6 Others Mouse 小鼠 EPHA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯氧乙酸鈉(>98%,BR)Phenoxyaceti acid  salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人骨骼肌細胞總RNAHSkMC NA水楊酸苯酯(>98%,BR)Phenyl salicylate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照) 1脂酶A2Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom質(zhì)量規(guī)格：比活性：>200U/mg，BC

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6對尼泊金丁酯鈉(>98%,USP)p-Hydroxybenzoic acid butyl ester  salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP

MIApaca-2細胞，人細胞 人成纖維細胞,HT1080細胞 615小鼠瘤株;HP615尼泊金乙酯鈉(>98.5%,BR)p-Hydroxybenzoic acid ethyl ester  salt質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。