操作流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：生殖支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycoplasma genitalium
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
生殖支原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
人腦成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL鄰本二酸二(2-乙基己基)酯10毫升

3T3-E1細胞，鼠胚成骨細胞 U937(組織細胞瘤) 山羊皮膚細胞;WGS1錄化;六水三錄化 Chromic chloridq hqxchydrctq 10060-1-2

EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)石蠟油 (培養(yǎng)級) Mineral oil (for mouse embryo cell cul... 8042-47-5 100ML 通用試劑

CW-2(人細胞) 5×106cells/瓶×2 細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)M-H瓊脂平板1米

人表皮色素細胞-中色素HEM-m(除草劑)
G-401細胞，人Wilms 人癌細胞,MX-1細胞 周細胞生長添加物PGSPIPES1,4-二乙磺酸10克BR，98%

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5對乙酰胺基苯磺酰 N-Acetylsulfanilyl chloride,98% 121-60-8 25G 通用試劑

IL27RA Others Human 人 IL27Ra / TCCR / WSX1 人細胞裂解液 (陽性對照) 糠偶酰 98% Furil 49-94-4

高背鯽魚尾鰭細胞;GBJdAzone月桂氮卓酮1克AR，99.5%

NRP1 Others Human 人 Neuropilin-1 / NRP1 / CD304 人細胞裂解液 (陽性對照) 高錄酸(*)¤(易)PERCHLORIC ACID
正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性);NRK49F伊洛馬司他(GM6001)Ilomastat,GM6001,Galardin質(zhì)量規(guī)格：>98%,MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑

CSF1R Others Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 (aa 543-922) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 愈創(chuàng)木酚縮水甘油 Guaiacol glycidyl ether質(zhì)量規(guī)格：>98%

T-105AIII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL4-氨基安替比林4-Aminoantipyrine質(zhì)量規(guī)格：AR,分析

SK-MEL-1, 人皮膚色素瘤細胞 細胞,CEM細胞 SW579(人細胞)N-溴代丁二(NBS)N-bromosuccinimide質(zhì)量規(guī)格：AR

小鼠胚胎成纖維細胞;MEF溶葡球菌酶,溶葡萄球菌酶 Lysostaphin質(zhì)量規(guī)格：BR,5000U/Pack
生殖支原體探針法熒光定量PCR試劑盒人海馬趾神經(jīng)細胞cDNAHN-h cDNA吡羅昔康-d3Piroxicam-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口

PRKAR1A Others Human 人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 泊沙康唑-d4Posaconazole-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口

T739小鼠肺腺株;LA795利福昔明標(biāo)記d6Riimin - Labeled d6質(zhì)量規(guī)格：美國進口

HCCC-9810細胞，人亞力山大細胞 人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株,7WCY1.0細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2羅匹尼羅N-氧化物Ropinirole N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

Lec1(倉鼠卵巢細胞) 5×106cells/瓶×23-氧羅匹尼羅鹽酸鹽3-Oxo Ropinirole Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。