產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycoplasma felis
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
CFPAC-1細(xì)胞，人細(xì)胞 人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞,RD細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albinoβ-Alanine3-基酸10克BR，98%

Hs 578T(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2二甲基黃 Dimethyl yellow,98% 1960-11-7 10G 通用試劑

Cellgro 25-072-CV Lymphocyte Separation Medium(人細(xì)胞分離液) 500ml錄化金(+4℃)(陰涼);四錄金醋;錄金水合物 Gold(III) chloridq hydrctq;xy7nogqn tqtrcchlorocurctq(III) hydrctq;Tqtrcchlorocuric(III) ccid 13423-07-1

人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟裂解物HPA-v LPROTEINMWMARKER,LOWRANGE蛋白Marker生物技術(shù)級暗藍(lán)色透明液體FROZENsigma

CHEK2 Others Mouse 小鼠 CHK2 / CHEK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 923-61-5二棕櫚酰-L-a-1脂酰1,2-DIPALMITOYL-SN-GLYCERO-3-PHOSPHOETHANOLAMINE
狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1Dimetxylyellow甲基黃25克電泳級，90%

人成纖維細(xì)胞(HPrF)(5×105)1,3-二錄本;間二錄本 1,3-Dichlorobqnzqnq 241-73-1

CL-0123IBRS-2(豬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2工;水銀 Mqrcury;Quick silvqr

人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R 大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLZ-甘酰-L-脯酰-L-精酰對硝基鹽，英文名或英文縮寫：Z-Gly-Pro-Arg PNA acetate salt，級別：BR，98%，規(guī)格：5克

BEL/FU 人尿嘧啶耐藥株肝素鈉標(biāo)準(zhǔn)品(冷凍運(yùn)輸)NA
Tsu-Pr1細(xì)胞，非型 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞,KLE細(xì)胞 微內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHCMEC cDNA依匹斯汀Epinastine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO9,13b-脫氫依匹斯汀鹽酸鹽9,13b-Dehydro Epinastine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 7-氯依匹斯汀鹽酸鹽7-Chloro Epinastine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK9-氧絡(luò)依匹斯汀鹽酸鹽9-Oxo Epinastine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 6β-羥基依普利酮6β-Hydroxy Eplerenone質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒Hep3B2.1-7細(xì)胞，人細(xì)胞 人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞,D341Med細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24吡嗪酰胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Pyrazinamide質(zhì)量規(guī)格：含量測定

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2鹽酸地美環(huán)素；去甲基金霉素Demeclocycline hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>900μg/mg,BR

Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化培養(yǎng)基無誘導(dǎo)劑(即用型) 100ml鹽酸地美環(huán)素；去甲基金霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Demeclocycline hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：效價測定,標(biāo)準(zhǔn)品

人海馬趾神經(jīng)元RNAHN-h miRNA5 μg甲基帕羅西汀N-Methyl Paroxetine質(zhì)量規(guī)格：>99%

小鼠神經(jīng)質(zhì)細(xì)胞(MN-sn)(1×106)硫酸頭孢喹諾Cefquinome sulfate質(zhì)量規(guī)格：干品Cefquinome>80%,BR