PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
分枝桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：分枝桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycobacterium spp.
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1 人子細(xì)胞，HT-3細(xì)胞 SK-BR-3(腺癌細(xì)胞)TG101209質(zhì)量規(guī)格：>98%，選擇性JAK2抑制劑TG-101209;TG 101209

人細(xì)胞;HOS鹽酸阿扎司瓊（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Azasetron Hydrochloride

REG3G Others Human 人 REG3G / PAP1B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸普萘洛爾（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：溶出度檢查Propranolol Hydrochloride

胃粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)美他多辛（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定Metadoxine

STX8 Others Human 人 STX8 / Syaxin 8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 激素釋放激素相關(guān)蛋白（1-13），人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRGn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), human
人成細(xì)胞;MG-63 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鄰本二羧酸-二-C8-10支鏈烷基酯，英文名或英文縮寫：DINP，級別：AR，98%，規(guī)格：25克

骨骼肌細(xì)胞生長添加物SkMCGS碳醋輕銨 cmmonium biccronctq 1066-33-7

VEGFA Others Human 人 VEGF121b / VEGF-A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鱗醋二正丁酯 Dibutyl phosphctq 107-66-4

人癌細(xì)胞;MDA-MB-435S元素光譜粉shēng huà shì jì容量：RT10克

CNE-2Z細(xì)胞，人母系細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,SP2/0細(xì)胞 恒河猴腎細(xì)胞;RM-1Brij-35 200g/5kg原裝 Sigma P1254
大鼠肺大平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(牛)INSULIN質(zhì)量規(guī)格：BR，27U/mg,進(jìn)分

FRhK-4細(xì)胞，恒河猴胚腎細(xì)胞 EB-3 [EB3](人樣Butt瘤細(xì)胞) CM-H026人內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLL-天門冬氨酸鉀L-Aspartate Potassium質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

BTC Protein Human 重組人 BTC / Betacellulin 蛋白輔酶Q10,泛醌Coenzyme Q10,Ubiquinone質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

MKN45(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 皮下脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)輔酶Q10(標(biāo)準(zhǔn)品)Coenzyme Q10質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)維生素A醋酸酯（標(biāo)準(zhǔn)品）vitamin A acetate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品
分枝桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒EC9706 表戈米辛O（標(biāo)準(zhǔn)品）Epigomisin O質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

SW620人細(xì)胞 SW620 human colon cancer cells L-15+10%FBS琥珀酸鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）Hydrocortisone  succinate質(zhì)量規(guī)格：含量測定

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)回拉西坦;茴拉西坦（標(biāo)準(zhǔn)品）Aniracetam質(zhì)量規(guī)格：含量測定

人胚胎絨毛細(xì)胞(HAF)(1×106 ) 細(xì)胞名稱 種屬卡絡(luò)磺鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）Carbazochrome  sulfonate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人上皮細(xì)胞;Hep-2卡絡(luò)磺鈉Carbazochrome  sulfonate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。