操作流程：
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

產品參數：
產品名稱：海豹分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycobacterium pinnipedii
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
海豹分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
HEC-1-B(人子宮內膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人細胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21α-溴異shēng huà shì jì容量：RT25克

人癌細胞;SK-BR-3葉綠速A(-20℃) CHLOROPHYLL c 479-61-8

CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / MAC-IP 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘油 (分子生物級) Glycerol (for molecular biology, ≥99%) 56-81-5 100ML 通用試劑

MJ(懸浮) 瘤MiddleBrook7H11瓊脂shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

95-D人高轉移細胞 Human high metastatic lung cancer cell line 95-D RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS(D-海藻糖)
人腦星形膠質母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]Fluridone1-甲基-3-本基-5-(3-三扶甲基本基)-4(1H)-酮150u高，95%

HBZY-1細胞，人腎小球髓母細胞 大鼠埀體瘤細胞,GH3細胞 CL-0210SiHa(人子宮頸鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2酚(異構體混和物) Crqsol 1319-77-3

Vero(非洲綠猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2C.L.E.D培養基shēng huà shì jì容量：200張/盒

NHEM-c M2 adult 正常人表皮素細胞(NHEM)成年捐獻者(M2培養液中培養) 500,000cells 胎盤羊膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)ADPDIwo7ium7iHYDRATE 5'-二嶙酸腺苷二鈉超級白色結晶粉末FROZENsigma

骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3-基基氧硅烷NA
NCI-H460(人細胞) 5×106cells/瓶×2 腎動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)胰酶(1:4500)Pancreatin質量規格：酶活1:4500,BR

支原體PCR檢測試劑盒MYCO枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君Orphenadrine 質量規格：>98%,BR

IL12A & IL12B Others Human 人 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) β-半乳糖苷酶β-Galactosidase質量規格：700u/mg，羅氏分裝

CatS2 家貓皮膚成纖維樣細胞脫落酸(標準品)Abscisic acid,S-ABA質量規格：98%,標準品

CL-0070CRFK(貓腎細胞)5×106cells/瓶×2脫落酸(高)Abscisic acid,S-ABA質量規格：98%,BR
海豹分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒CDH12 Others Human 人 CDH12 人細胞裂解液 (陽性對照) 丙二酸(AR)Malonate質量規格：>99.5%,AR

人滑膜細胞HS氯化錳四水Manganese (II) chloride, tetrahydrate質量規格：>98%

EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 干酪素Casein質量規格：BR

大鼠肝動脈內皮細胞完全培養基 100mL醫用凡士林Vaseline質量規格：BR

HMy2.CIR人B母細胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培養基(GIBCO)+20%FBS原釩酸鈉 orthovanadate質量規格：>96%,BR
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。