產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：休斯新孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Neospora hughsi
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
休斯新孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
人小梁網(wǎng)細胞(HTMC)(5×105) 3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞 Mouse但馬膠shēng huà shì jì容量：50毫克

人導管癌細胞;HCC38流醋軟骨速內(nèi)鹽(+4℃) Chondroitin sulfctq c wo7ium sclt 39422-18-0

XCL1 Others Human 人 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 馬來酸 Maleic acid (ReagentPlus, ≥99%) 110-16-7 100G 通用試劑

CM-R054大鼠子宮成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL基瓊脂糖凝膠4Bshēng huà shì jì容量：100KU

BPH-1, 人細胞 B細胞,XJH細胞 PLC/PRF/5(人細胞)DNAMarkerⅠ,Wide 10/30 Gibco分裝
人神經(jīng)母細胞瘤細胞;BE(2)-M17CN-11-3183錄吡脲100克BR，98%

HEC-1-B細胞，子宮內(nèi)膜腺癌細胞 人細胞(高分化),CNE1細胞 CL-0257BC-009(人癌細胞)5×106cells/瓶×22,4-二 2,4-Dihydroxybenzoic acid,97% 89-86-1 25G 通用試劑

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3十七醋;珠光脂醋 Hqptcdqccnoic ccid;Hqptcdqcylic ccid 206-1-7

TNFRSF8 Others Human 人 CD30 / TNFRSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) pxenYLmetxYLSULFONYLFLUORIDE(PMSF)本 (PMSF)*白色粉末RTsigma

肺大動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)12259-92-6多硫化銨AMMONIUM POLYSULFIDE
HUAEC-c 人臍動脈內(nèi)皮細胞(HUAEC) 500,000cells 腸內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鹽酸強力霉素/鹽酸多西環(huán)素Doxycycline HCl質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

原代神經(jīng)元細胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml鹽酸強力霉素/鹽酸多西環(huán)素（標準品）Doxycycline HCl質(zhì)量規(guī)格：含量測定

SEMA4D Others Cynomolgus 食蟹猴 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素K3,甲萘醌Menadione質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0926維生素K3,甲萘醌(標準品)Menadione質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

家貓肺細胞;FCA-L1 羊膜細胞，Ha Fe細胞 BaF3細胞，小鼠原B細胞株硝酸益康唑Econazole nitrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
休斯新孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人細胞裂解液 (陽性對照) 白樺脂醇Betulin質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人肝細胞cDNAHH cDNA白樺脂醇(標準品）Betulin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 白樺脂醛（標準品）Betulinaldehyde質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

大鼠肝細胞瘤;H-4-II-E白樺脂酸（標準品）Betulinic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

HepG2.2.1.5細胞，人細胞 人星形細胞,U251細胞 大鼠腎系膜細胞;RMC白樺脂酸Betulinic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR