產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycobacterium scrofulaceum
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞酸鋇shēng huà shì jì容量：RT500毫升

RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細(xì)胞 COS-7(SV40 轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞)姆沙伯 W AW ChroMosorb W cW;

人細(xì)胞;CNE-2Z重蒸酚 () Phenol * 250ML 通用試劑

DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氫-鉀ATP酶測試盒50支/包RT

人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1(DNA高分子量標(biāo)準(zhǔn))
GLYCOPROTEIN Others Sudan ebolavirus 蘇丹病毒 Glycoprotein / GP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) YGC瓊脂shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫升

人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH72(5H)-同 98% 2(5 H)-THIOPHqNONq 3324/3/3

敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1 貓腎細(xì)胞，CRFK細(xì)胞 Cyc-Tag(S49)細(xì)胞，小鼠T細(xì)胞瘤細(xì)胞硫柳鈉shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克

人胚;HFL-I刃天青shēng huà shì jì容量：100克

CRP Others Mouse 小鼠 CRP / PTX1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) PonceauS 10g/25g/100ml Amresco分裝
C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞胰多肽，大鼠Pancreatic Polypeptide, rat質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞(傣族);KM9403 人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL甲狀旁腺激素（1-38），人Parathyroid Hormone (1-38),human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

上皮細(xì)胞生長添加物BEpiCGS五肽胃泌素Pentagastrin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 肽YY，人Peptide YY, Human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

人癌細(xì)胞;MCF7肽YY，犬，大鼠，小鼠，豬Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒FGF9 Protein Canine 重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)丙泊酚葡萄糖苷酸Propofol Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

A3(人T細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml4-羥基丙泊酚4-Hydroxy Propofol質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人滑膜細(xì)胞cDNAHS cDNA2,2-二甲基-4-異丙基-1,3-苯并二茂2,2-Dimethyl-4-isopropyl-1,3-benzodioxole質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-羥基丙泊酚4-O-β-D-葡萄糖苷酸4-Hydroxy Propofol 4-O-β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4-羥基丙泊酚1-O-β-D-葡萄糖苷酸4-Hydroxy Propofol 1-O-β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口