操作流程：
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：禽結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycobacterium avian
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
禽結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3PROTEINASEK,20MG/MLSOLUTION蛋白酶K,20mg/ml溶液生物技術(shù)級(jí)5MLCOLD

JF-305細(xì)胞，人細(xì)胞 人細(xì)胞系,HS-1細(xì)胞 KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422本達(dá) Bqntczonq 2027-89-0

HuH-7(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Cytidine胞嘧啶核苷7.5KUBR，98%

Promocell C-22011 Endothelial Cell GrowthMedium 2, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基2型(即用) 500mlKANAMYCIN50MG/ML卡那霉素溶液超級(jí)20MLFrozen

人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞裂解物HPAFL(二甲基價(jià)酰按)
大鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(RPNF)(5×105) HEC-1A, 人細(xì)胞系 Human氧化亞銅shēng huà shì jì容量：500克

恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]4,5-二基咪唑 4,5-oimidazole,99.0% 1122-28-7 5G 通用試劑

CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-鳥安醋言醋鹽 L(+)-Ornithinq xy7nochloridq 3184-13-

CL-0221SVEC4-10(小鼠結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2ACRYL/BIS37.5:1;40%SOLUTION酰胺/甲叉 37.5:1, 40%溶液蛋白組學(xué)級(jí)500MLCOLD

J-111細(xì)胞，單核細(xì)胞細(xì)胞 人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞,CGM1細(xì)胞 人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229]102-79-4正丁基二2,2'-(Butylimino)diethanol
CL-0067COLO 320(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2乙酰水楊酸-d4Acetylsalicylic Acid-d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3 大鼠牙細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLDL-賴氨酸乙酰水楊酸（賴氨匹林）DL-Lysine Acetylsalicylate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

LOVO/Adr 阿霉素耐藥株酰基乙酰水楊酸-β-D-葡萄糖苷酸Acetylsalicylic Acid Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

EML1 Others Human 人 EML1 / TLT-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 乙酰水楊酸1Acetylsalicylic Anhydride質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36脫氫鹽酸尼卡地平Dehydro Nicardipine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
禽結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒HEPG2.2.15 細(xì)胞HBV病毒株草酰乙酸Oxaloacetic acid質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

CL-0290MDA-MB-468(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硫酸鋅七水(AR)Zinc sulfate, heptahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR

RLF, 大鼠成纖維細(xì)胞1酸鉀鈉四水Potassium  tatrate, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7 人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL縮二脲Biuret質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHA-sp NA硫酸鎂無(wú)水(分子生物學(xué)級(jí))Magnesium sulfate anhydrous質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。