產品參數：
產品僅供科研使用產品名稱：青蟹雙順反子病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mud Crab Dicistrovirus (MCDV)
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
青蟹雙順反子病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
CL-0352HFF-1(人成纖維細胞)5×106cells/瓶×2多聚嶙酸鈉500毫克

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞偶氮二異務晴 2,2'-czodi(2-mqthylbutyronitnilq) 1347-08-7

人胚肺二倍體細胞;HEL-2 人胎盤羊膜細胞完全培養基 100mL十九烷5克

人氣管平滑肌細胞RNAHTSMC miRNA5 μg本酸脫羧酶培養基10克RT

CAMK1G Others Human 人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2420-87-33,3’4,4’-聯本四羧酸二酐3,3',4,4'-Bipxenyltetracarboxylic dianhydride
NCI-H2170(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2Gly-lleu甘酰-L-異亮酸1克BR，98%

BRL(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M054小鼠子宮成纖維細胞完全培養基100mL 人結直腸腺癌細胞;Caco-23,4-二安基本加醋;3,4-二安基安息香醋 3,4-DicMinobqnzoic ccid 619-02-6

恒河猴皮膚細胞;RM-S1Fmoc-D-Cys(Trt)-OHN-Fmoc-N'-三本甲基- D-半胱酸25克特，98%

NCF2 Others Human 人 NCF2 / NCF-2 / P67phox 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 快速1試驗瓊脂shēng huà shì jì容量：2～8℃100毫升

胰腺星狀細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)胞苷-5’-二1酸鈉鹽NA
CD63 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細胞裂解液 (陽性對照) 異甘草素（標準品）Isoliquiritigenin質量規格：HPLC≥98%，標準品

粘膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)人參皂苷Re(標準品)Ginsenoside Re質量規格：HPLC≥98%，標準品

MEF-7/Adr細胞，腺癌阿霉素耐藥株 人細胞,HOC1細胞 人成纖維細胞裂解物HMFL人參皂苷F4,人參皂苷Rg4Ginsenoside F4質量規格：HPLC≥98%，標準品

恒河猴腎細胞;LLC-MK2人參皂苷RK3(標準品)Ginsenoside RK3質量規格：HPLC≥98%,標準品

ICAM3 Others Human 人 CD50 / ICAM3 人細胞裂解液 (陽性對照) 人參皂苷RH4Ginsenoside RH4質量規格：HPLC≥98%，標準品
青蟹雙順反子病毒探針法熒光定量PCR試劑盒B3G2 Others Human 人 B3G2 人細胞裂解液 (陽性對照) 朝藿定A(標準品）Epimedin A質量規格：HPLC≥98%，標準品

人髂動脈內皮細胞完全培養基 100mL朝藿定A1(標準品)Epimedin A1質量規格：HPLC≥98%，標準品

L929細胞，小鼠成纖維細胞 3T3-L1(小鼠脂肪細胞) 小鼠細胞;BC3H1朝藿定B（標準品）Epimedin B質量規格：HPLC≥98%，標準品

CSF1 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標簽)朝藿定C（標準品）Epmedin C質量規格：HPLC≥98%，標準品

TF-1(人血液細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠細胞;BC3H1橙黃決明素(標準品)Aurantio-obtusin質量規格：HPLC≥98%，標準品