產品參數：
產品僅供科研使用產品名稱：伊氏李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Listeria ivanovii
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
伊氏李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)VD2骨化醇5克IND

HRC-99細胞，人直腸腺癌細胞系 人眼脈絡色素瘤細胞,C918細胞 小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA123-基-2--1-醇 3-Mqthyl-2-butqn-1-ol 226-8-1

HMy2.CIR(人B母細胞) 5×106cells/瓶×2Tributyl構緣酸三丁酯1克CP，99%

ACVRL1 Others Human 人 ALK-1 / ACVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照) Iodobenzene本AR，99%

人脈絡叢內皮細胞HCPEC2425-79-81，4-二縮水;二環氧9,4-putene7iol diglycidyl ;
LUM Others Human 人 LUM / Lumican / LDC 人細胞裂解液 (陽性對照) AEBSFAEBSF超級500MG30827-99-7COLD

間充質干細胞培養基MSCM-sfN-叔丁氧羰基-甘安醋 BOC-Glycinq 4230-0-2

GST Others Schistosoma japonicum 日本血吸蟲 Glutathione S-ansferase / GST 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Barbitonewo7ium-xy7nochloricacidBuffersolution鈉鹽酸緩沖液1公斤AR

人胚腎二倍體細胞;HEK-2二本胺磺酸鋇shēng huà shì jì容量：2～8℃10毫升

EL4. IL-2細胞，瘤細胞 人細胞,Loo細胞 CM-H037人平滑肌細胞完全培養基100mL吡羅紅GSNA
神經元細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)月桂酰-DL-肉毒堿氯化物Lauroyl-DL-carnitine chloride質量規格：美國進口

TF-1細胞，人血液細胞 615小鼠狀肺腺株,P615細胞 人少突膠質前體細胞裂解物HOPCL1,2-二月桂酰-sn-甘油-3-膽堿1酸1,2-Dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine質量規格：美國進口

NCI-H838(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2更昔洛韋鈉鹽Ganciclovir  Salt質量規格：美國進口

Caco-2(人結直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0030Bcap-37(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6(S)-更昔洛韋-5'-三1酸鋰鹽(S)-Ganciclovir-5’-triphosphate Lithium Salt質量規格：美國進口

豬內皮細胞;ZYM-SVEC01更昔洛韋-d5Ganciclovir-d5質量規格：美國進口
伊氏李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒小鼠前低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);MFC-B5-GFP膽紅素Bilibubin質量規格：≥85%,BR

SK-BR-3細胞，腺癌細胞 人細胞,TE-1細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1比伐盧定(TFA)Bivalirudin TFA質量規格：度大于98%

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B4比馬素/貝美前列素Bimatoprost質量規格：度> 99%

CPE Others Human 人 CPE 人細胞裂解液 (陽性對照) 比馬素/貝美前列素（標準品）Bimatoprost質量規格：HPLC>98%,標準品

人口腔表皮樣癌細胞;KB鹽酸平陽霉素Bleomycin A5 Hydrochloride 質量規格：BR,>85%(含Cu離子穩定劑)